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  • 汉坦病毒76-118株G2基因的克隆及其在甲基营养型酵母中的表达

    作者:姚智慧;祝晓春;董关木;贺争鸣;俞永新

    目的获得汉坦病毒囊膜蛋白G2体外表达产物.方法应用RT-PCR方法扩增汉坦病毒76-118株M片段编码的G2蛋白基因,并将扩增产物分别插入pPIC9K和pHIL-S1载体,命名为pPIC9K-G2和pHIL-S1-G2,分别与酵母的α因子信号肽和PH01信号肽3'端融合,处于醇氧化物酶(AOX1)启动子下游.这2个载体经线性化后分别转化甲基营养型酵母菌株GS115和SMD1168,筛选后分别得到His+ Muts转化子和His+Mut+转化子,诱导表达后,用Dot-ELISA检测.结果 Dot-ELISA检测为阳性.结论成功地表达了汉坦病毒G2囊膜蛋白,为进一步研究其结构功能以及生物学特性奠定了良好基础.

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