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IVB型纤毛结构蛋白文献资料
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运用SELEX技术筛选特异性高亲和IVB型纤毛结构蛋白RNA适配子
目的获得特异性高亲和IVB型纤毛结构蛋白prepilS的RNA适配子(aptamers),为开发预防、治疗伤寒杆菌肠热症的新型药物试剂奠定基础.方法采用SELEX技术(Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment)筛选IVB型纤毛结构蛋白prepilS的特异性适配子,通过体外构建一个长度为88 nt含有30个随机序列的单链DNA(ssDNA)文库,PCR扩增为双链DNA随机文库后,体外转录构建RNA随机文库,以Sepharose 4B为筛选介质,筛选具有特异性高亲和力prepilS蛋白的RNA适配子.结果经8轮筛选获得具有特异性高亲和prepilS蛋白的RNA适配子库.结论成功地筛选出具有特异性高亲和力的RNA适配子库,该RNA适配子库可显著抑制伤寒杆菌侵入THP-1细胞.
关键词: 伤寒杆菌 IVB型纤毛结构蛋白 SELEX技术