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GM-CSF IL-2 融合蛋白 分泌表达文献资料
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分泌型rhGM-CSF/IL-2融合蛋白表达载体的构建
目的将GM-CSF基因与IL-2基因通过一中间接头G-G-G-S-G-G-S-G连接到一起,并在E.coli中分泌表达具有更高GM-CSF和IL-2生物活性的融合蛋白分子.方法在引物设计中,通过选择密码子,在Linker的中前部设计了一个BamHI酶切位点,GM-CSF的下游引物和IL-2的上游引物均起始于该位点.然后通过PCR、酶切、连接等一系列分子克隆的方法,构建融合蛋白的克隆及表达载体.结果经EcoRI/SaII双酶切鉴定,克隆载体pUC19GM-CSF/L/IL-2及表达载体pBVGMCSF/L/IL-2中均插入了正确的外源片段.结论克隆及表达载体的成功构建,为进一步表达融合蛋白及活性研究打下了基础.
