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重组人EC-SOD文献资料
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重组人EC-SOD包涵体的稀释复性及重折叠后蛋白的纯化
目的确定重组人EC-SOD包涵体体外稀释复性和复性后蛋白纯化的适宜方法.方法通过对pH、温度、包涵体蛋白浓度、尿素和精氨酸浓度及氧化还原对比率的定性定量分析,研究重组人EC-SOD包涵体体外稀释复性的基本条件.采用金属离子亲和柱(IMAC)和肝素亲和柱(Heparin-sepharose)对复性蛋白进行纯化,比较纯化效率的差异.结果佳复性条件为pH8.5,尿素浓度为1.5 mol/L,精氨酸浓度大于0.3 mol/L,GSH:GSSG=4:1;复性温度及包涵体蛋白终浓度越高,复性效率越低.IMAC和Heparin-sepharose亲和柱均可用来纯化复性蛋白溶液,但Heparin-sepharose纯化效率较高.结论确定了重组人EC-SOD包涵体体外稀释复性的佳条件及复性后蛋白纯化的方法.
