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麻痹性贝类毒素GTX2,3单克隆抗体在直接竞争ELISA检测方法中的应用
目的 利用麻痹性贝类毒素GTX2,3单克隆抗体建立麻痹性贝类毒素GTX2,3直接竞争ELISA(dc-ELISA)检测方法.方法 通过过氧化反应将GTX2,3与辣根过氧化物酶(HRP)偶联.以兔抗小鼠IgG多抗为包被抗体,GTX2,3为竞争剂,与GTX2,3-HRP竞争结合GTX2,3单克隆抗体,初步建立检测麻痹性贝类毒素GTX2,3的dc-ELISA,并用该方法检测GTX2,3单克隆抗体与C2毒素之间的交叉反应.结果 直接ELISA检测证实GTX2,3与HRP偶联成功.dc-ELISA检测麻痹性贝类毒素GTX2,3的灵敏度为1.5 μg/ml,工作范围为1.5～40 μg/ml,GTX2,3毒素与C2毒素无交叉反应.该方法具有良好的特异性.结论 dc-ELISA适用于麻痹性贝类毒素的快速检测.
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麻痹性贝类毒素GTX2,3间接与直接竞争酶免疫学检测方法的比较研究
目的:初步比较麻痹性贝类毒素GTX2,3间接竞争酶免疫学检测方法(idc-ELJSA)与直接竞争酶免疫学检测方法(dc-ELISA).方法:用高碘酸盐氧化法制备GTX2,3-HRP偶联物并用直接ELISA对其进行鉴定.分别用GTX2,3与葡萄糖氧化酶(GOX)的偶联物GTX2,3-GOX和兔抗小鼠IgG多抗做为包被抗原,用GTX2,3标准毒素作为抑制剂,做间接及直接竞争ELISA,确定并比较两种ELISA的特异性、灵敏度、检测限、工作范围.结果:成功制备出GTX2,3-HRP偶联物,间接和直接竞争ELISA灵敏度分别为10μg/ml和4μg/ml,检测限为6.25μg/ml和0.5μg/ml,工作范围为6～50μg/ml和0.5～50μg/ml.结论:两种竞争ELISA都能应用于麻痹性贝类毒素的快速检测,但dc-ELISA比idc-ELISA更加灵敏,更适合于进一步的研究.
