首页 > 文献资料
-
泰乐菌素单克隆抗体的制备及竞争ELISA检测方法的建立
目的 制备泰乐菌素(Tylosin)单克隆抗体,并建立泰乐菌素竞争ELISA检测方法.方法 用羰基二咪唑将半抗原泰乐菌素分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联,制备泰乐菌素免疫抗原Tylosin-BSA和检测抗原Tylosin-OVA,用紫外光谱扫描检测Tylosin-BSA偶联物,辣根过氧化物酶标记Tylosin-OVA偶联物.采用杂交瘤技术,制备特异性抗泰乐菌素单克隆抗体,建立泰乐菌素竞争ELISA检测方法.结果 筛选出2株稳定分泌抗泰乐菌素单抗的杂交瘤细胞株3FA和2G10,2G10分泌的单抗腹水效价为6×10-4,抗体类型为IgG1型,轻链为k链,在酸、碱及热条件下均较稳定.选择该单抗建立了泰乐菌素竞争ELISA检测方法.该方法灵敏度达50 ng/ml,标准曲线线性关系良好(r=0.982 7),且特异性、稳定性较好,准确性、精密性较高.结论 已成功制备了泰乐菌素单克隆抗体,并建立了竞争ELISA检测方法,可用于动物源性食品中残留泰乐菌素含量的检测.
关键词： 泰乐菌素 单克隆抗体 竞争酶联免疫吸附试验 -
利福霉素单克隆抗体的制备及竞争ELISA检测方法的建立
目的 制备利福霉素单克隆抗体,并建立利福霉素竞争ELISA检测方法.方法 通过利福霉素与载体蛋白(BSA、OVA)偶联,制备免疫原和检测抗原,用杂交瘤技术制备单克隆抗体,建立利福霉素竞争ELISA检测方法.结果 筛选出5株能稳定分泌抗利福霉素单抗的杂交瘤细胞株,均分泌IgG抗体,其中2H1、5H5、3F12和2C8株的轻链是κ链,3A2株的轻链是λ链;5株单抗为同一位阻群;在碱性条件下较稳定.建立的利福霉素竞争ELISA检测法灵敏度为6 ng/ml,与利福平无交叉反应,稳定性良好.结论 已成功制备了利福霉素单克隆抗体,并建立了利福霉素竞争ELISA检测法.
关键词： 利福霉素 单克隆抗体 竞争酶联免疫吸附试验 -
微囊藻毒素LR的定量检测研究
目的 制备MC-LR的单克隆抗体,初步建立微囊藻毒素LR定量检测的竞争ELISA方法.方法 从云南滇池中收集蓝藻,提取MC-LR精制样品,与牛血清白蛋白偶联,制备成MC-LR-BSA完全抗原,免疫BALB/c小鼠将免疫鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,制备抗MC-LR特异性单克隆抗体.应用制备的单克隆抗体对不同稀释浓度的MC-LR样品进行竞争ELISA定量检测.结果 制备了3株抗MC-LR的单克隆抗体,MC-LR样品的竞争ELISA定量检测显示浓度从高到低的相应A值呈现明显的递增梯度趋势.结论 制备的MC-LR单克隆抗体能够用于MC-LR的定量检测.
关键词： 微囊藻毒素 完全抗原 单克隆抗体 竞争酶联免疫吸附试验
