您当前的位置：
首页 > 文献资料
所属专业：
人角蛋白19文献资料
-
非小细胞肺癌生物标记物角蛋白19基因的克隆、表达及纯化
目的 克隆人角蛋白19(CK19)基因,原核表达重组蛋白并纯化,为建立一种新的非小细胞肺癌诊断方法奠定基础.方法 从宫颈癌HeLa细胞株中提取总RNA,经RT-PCR合成cDNA,设计特异性的引物,用PCR的方法扩增目的片段,构建pET-32a-CK19和pGEX-4T1-CK19表达载体,在BL21大肠杆菌中表达CK19重组蛋白纯化,并进行SDS-PAGE及Western blot鉴定.结果 经PCR扩增后得到一条420 bp的DNA片段,构建载体后DNA测序,结果与预期序列一致.初步结果鉴定表明,表达和纯化的融合蛋白,与预期结果一致.结论 成功克隆CK19基因,并获得高纯度的CK19融合蛋白,为进一步制备体外诊断试剂打下基础.
