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脱氨神经氨酸文献资料
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LC-MS/MS法检测猪内脏和肌肉中N-乙酰神经氨酸、N-羟乙酰氨酸和脱氨神经氨酸浓度的研究
目的:建立液相色谱-三重四级杆质谱联用法(LC-MS/MS)测定猪内脏和肌肉组织中唾液酸N-乙酰神经氨酸(Neu5Ac)、N-羟乙酰神经氨酸(Neu5Gc)和脱氨神经氨酸(KDN)浓度的分析方法.方法:将内脏肉组织匀浆后,利用三氟乙酸(TFA)将结合态的唾液酸从糖脂或糖蛋白链上解离下来后进样分析.色谱条件:色谱柱为ZORBAX Eclipse Plus C18(5μm,4.6× 250 mm,Waters),流动相为0.1％醋酸铵-100％乙腈(9:1),柱温:25℃,流速800 μL.min-1,进样量20μL.质谱条件:离子源为电喷雾化离子源(ESI),扫描方式为多重反应监测(MRM),监测离子对:Neu5Ac:307.7 →87.0,Neu5Gc:323.3 →116.0,KDN:266.7 →87.0,13C3Neu5Ac内标品:310.9 →90.0.结果:Neu5 Ac、Neu5Gc和KDN分别在0.1～20.0、0.05～10.00和0.005～1.000μmol.L-1的浓度范围内和对照品与内标峰面积比值线性关系良好,重复性平均RSD为1.2％,稳定性平均RSD为1.9％,日间和日内精密度试验RSD均小于6.7％,平均回收率为92.9～106.4％.结论:本方法简便、快速、灵敏度高,可广泛运用于组织和体液中唾液酸的测定.
