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长链非编码RNA对HepG2肝癌细胞增殖及凋亡的影响
目的:探讨长链非编码RNA RP13-514E23.1在肝癌细胞系中的表达,并观察上调该基因后其下游基因MAPK 10的变化及对肝癌细胞HepG2增殖、凋亡的影响.方法:通过荧光定量PCR(qRT-PCR)检测RP13-514E23.1在正常肝细胞与肝癌细胞系中的表达差异,进一步构建质粒转染肝癌HepG2细胞上调RP13-514E23.1的表达,以Mock组(只加转染试剂)和NC组(转染空载体pcDNA3.1-NC)作为对照评估转染效率及对MAPK 10表达的影响.用CCK-8实验和流式细胞术检测转染前后HepG2细胞的增殖、凋亡的变化.结果:LncRNA RP 13-514E23.1在大部分肝癌细胞系(HepG2,SMMC,Huh7,Hep3B)中的表达明显低于正常肝细胞(0.58± 0.05 vs 1.00,P ＜0.05);转染pcDNA-RP 13-514E23.1后,qRT-PCR检测HepG2细胞的RP13-514E23.1和MAPK10mRNA表达量显著升高(分别为29.90± 1.40、2.42± 0.25,P＜0.05),western blot检测MAPK10蛋白表达量较对照组也升高(2.10± 0.16,P＜0.05);CCK-8结果显示HepG2细胞在各个时间段增殖均受到抑制(P＜0.01),Mock组、NC组和实验组的凋亡率分别为(5.53±1.17)％、(6.40±2.84)％和(46.87± 3.45)％(P＜0.01).结论:LncRNA RP 13-514E23.1在肝癌细胞系中表达异常降低,上调其表达后MAPK 10的表达升高,且HepG2细胞增殖受到抑制、凋亡增加.
