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β-己糖苷酶释放文献资料
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小鼠骨髓来源肥大细胞的培养及鉴定
目的:探讨小鼠骨髓来源肥大细胞体外大量培养及鉴定方法.方法:采用IL-3(10 ng/mL)和不同浓度的SCF联合刺激小鼠骨髓细胞,培养四周,采用普通光学显微镜观察细胞形态,牛鲍氏血细胞计数板进行细胞计数,甲苯胺蓝染色观察其胞浆颗粒物质,流式细胞仪检测细胞表面CD117和FcεRI的表达情况,β-己糖苷酶释放试验评估肥大细胞活化能力.结果:培养条件为10ng/mL IL-3和20 ng/mL SCF时,悬浮细胞数目能达到1x 108细胞,其中CD117和FcεRI双阳性细胞比例迭90％以上;甲苯胺蓝染色可见细胞胞浆含有大量紫红色颗粒;细胞经IgE-DNP致敏及DNP-HSA激发后,β-己糖苷酶释放率明显增加,且SCF能促进肥大细胞释放β-己糖苷酶.结论:采用10 ng/mLⅡ-3和20 ng/mL SCF诱导骨髓细胞能够获得大量高纯度的小鼠骨髓来源肥大细胞,为肥大细胞特性及功能学研究提供了基础.
