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ameloblastin文献资料
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小鼠ameloblastin基因重组慢性病毒表达载体的构建及表达
目的:构建表达小鼠ameloblastin基因的慢性病毒表达载体,生产有感染及表达能力的病毒.为进一步研究ameloblastin基因在牙釉质形成中的功能奠定基础.方法:利用RT-PCR的方法从出生后1 d钟状期小鼠牙胚组织total RNA中扩增ameloblastin编码区cDNA,并克隆到pCRⅡ-TOPO载体中,再亚克隆到pNL-IRES2-EGFP中.将病毒三质粒系统转染293T细胞,收集病毒,并鉴定病毒感染及表达能力.结果:通过酶切和PCR的方法鉴定ameloblastin基因已成功的构建入慢性病毒表达载体pNLIRES2-EGFP中,经293T细胞生产的病毒感染人牙髓干细胞(DPSCs),DPSCs有较强荧光发出,并可稳定表达ameloblastin基因.结论:成功的构建了慢性病毒表达载体,并获得有感染及表达能力的病毒.
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人牙釉质蛋白Amelotin,Ameloblastin 及Enamelin基因启动子的初步研究
目的 分析人釉成熟蛋白(Amelotin,AMTN)、成釉蛋白(Ameloblastin,AMBN)与釉蛋白(Enamelin,ENAM)基因上游启动子序列,构建不同长度的基因上游启动子报告基因载体,为进一步判断启动子序列的转录调控区奠定基础.方法 利用软件分析基因启动子序列,以PCR方法 获取基因上游启动子片段,将其构建至报告基因载体pGL3-Basic中.结果 成功地获得了不同长度的Amelotin,Ameloblastin 及Enamelin基因启动子目的 片段,酶切鉴定表明不同长度启动子荧光素酶报告基因载体构建成功.结论 成功构建了不同长度启动子的pGL3-Basic荧光素酶报告基因载体,为进一步研究牙釉质蛋白基因启动子的转录活性及转录调控特点奠定基础.
