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  • 应用xMAP液念芯片多重快速检测四种病原微生物的研究

    作者:胡瑞;赵金银;陈德坤;刘艳华;高姗;康琳;高艳丽;王景林

    目的:建立一种多重、快速、特异性好、灵敏度高的病原微生物检测方法.方法:根据GenBank数据库中的小肠结肠炎耶尔森氏菌、单核细胞增生性李斯特菌、产气荚膜梭菌、鼠疫耶尔森氏菌基因序列,分别针对ail、hly、cpe、3a基因设计4时引物和4条探针.通过重叠PCR扩增各目的基因并构建重组质粒.以该重组质粒DNA为模板.通过多重PCR同时扩增上述4个基因,建立xMAP液态芯片检测技术,在此基础上对标准菌株基因组DNA进行检测并验证该方法的特异性和敏感性.结果:xMAP液态芯片对质粒DNA和标准菌株基因组DNA的检测结果与多重PCR结果一致.该方法能在3.5 h内同时完成对4种病原菌的检测,特异性好,且敏感性要高于PCR方法,灵敏度高可达200 CFU/ml.结论:xMAP液态芯片技术是病原微生物的多重快速检测的新方法,具有很好的应用价值和前景.

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