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阿拉伯糖内切酶文献资料
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源于纤维单胞菌的聚阿拉伯糖内切酶的分离纯化
目的:分离纯化一种由纤维单胞菌属(Cellulomonose sp.)的细菌发酵产生的具有聚阿拉伯糖内切酶的性质的蛋白酶.方法:用薄板层析法(TLC)分离酶促反应的产物-寡糖,以Quauti-Scan软件计算薄板上条带的面积灰度值,以此定量,计算酶活力.用Bradford法测定蛋白含量.通过DEAE-Sepharose离子交换层析,Sephacryl S-300分子筛和Blue-Dye活性染料亲和层析三种手段串联,对粗酶进行分离纯化,用SDS-PAGE测定纯度,SDS-PAGE和凝胶层析测定相对分子质量、结果:分离得到了电泳纯的阿拉伯糖内切酶,该酶的相对分子质量为45 kD,蛋白酶比活性为15.42x lip(U/ug),纯化倍数为77.1:结论:该酶是一种阿拉伯糖内切酶,可以作为一种新型的工具酶,应用于结核分枝杆菌细胞壁的结构分析及寻找抗结核药物作用的靶点.
