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  • 重组人纤维连接蛋白对CIK细胞增殖和杀伤活性的影响

    作者:王新玲;赵娟;吴杨佳子;吕慧敏

    目的:研究并探讨重组人纤维连接蛋白( RetroNectin , RN )对细胞因子诱导的杀伤细胞( CIK)增殖、免疫特性及对人类K562、LOVO细胞杀伤活性的影响。方法提取患者外周血单个核细胞,标本分为四组,对照组( CIK组):按常规方法诱导CIK增殖;C-CIK组:提前通过CD3 Ab包被诱导;R-CIK组:提前通过RetroNectin包被诱导;R+C-CIK组:提前通过RetroNectin及CD3 Ab包被诱导,记录各组免疫效应细胞不同时间段的增殖情况。流式细胞术检测各组细胞不同时间段的免疫表型变化;并用LDH法检测各组细胞对肿瘤细胞K562、LOVO杀伤活性。结果 R+C-CIK组细胞增殖倍数高于其他三组,差异有统计学意义( P<0.05);R+C-CIK组及R-CIK组的CD3+CD56+双阳性细胞所占百分比较C-CIK及CIK组高,d12和d15时有统计学差异(P<0.05);在效靶比20∶1和40∶1时,R+C-CIK及R-CIK组对K562的杀伤活性高于C-CIK及CIK组,杀伤活性有统计学差异(P<0.05),R+C-CIK组、R-CIK组及C-CIK组细胞对结肠癌细胞系LOVO的杀伤活性高于CIK 组,有统计学差异( P<0.05)。结论 RetroNectin联合抗CD3MAb包被技术应用于CIK体外培养可以获得增殖率和活性更高的免疫活性细胞,是值得临床推荐的一种有效的培养方法。

  • 重组人纤维连接蛋白对肝细胞肝癌患者自体CIK细胞体外扩增及生物学活性的影响

    作者:骆莹;朱争艳;郭红星;王鹏;刘辉;杜智

    目的 观察重组人纤维连接蛋白(RN)对肝细胞肝癌(HCC)患者细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)生物活性的影响,建立一种高效的CIK细胞体外扩增方法.方法 取15份HCC患者外周血,分离单个核细胞,分别使用传统方法(抗CD3 mAb+IFN-γ+ IL-2)和RN法(RN+抗CD3 mAb+ IL-2)诱导,观察不同时间点两组细胞形态、数目、细胞表型和杀伤效率.结果 与传统方法相比,RN组显著增加CIK细胞扩增倍数(P<0.05),是对照组的2.0~2.8倍,提高活化T细胞(CD25+T细胞)数量,增加CD3+ CD8+T细胞比例,增强对肝癌细胞株的杀瘤活性.结论 RN能够高效促进HCC患者CIK细胞的扩增,可以替代传统方法.

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