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加热对血管平滑肌细胞影响的实验研究
目的:近年来,加热治疗的效果在医学界得到了普遍的认可,射频消融术即是通过热量使旁路细胞发生凝固性坏死,从而治愈一些心律失常性疾病.但在血管平滑肌细胞中,尚未有加热治疗的报道.本研究探讨加热平滑肌细胞的作用,为体外加热已植入的支架治疗再狭窄提供基础研究数据.方法:采用原代平滑肌细胞培养的方法,对培养的平滑肌细胞进行加热,温度为37℃～54℃,加热10min,继续培养,光镜观察不同培养时间的细胞形态改变,台盼蓝鉴定细胞是否失去活力.结果:在温度小于44℃时,细胞的形态与正常相比基本无变化,培养液中也无脱落细胞,细胞生长也未受抑制.在46℃、48℃、50℃时,在随后培养10小时后,细胞开始呈圆形或椭圆型回缩,细胞浆呈串珠样改变,培养24小时,培养的细胞全部呈圆形回缩,培养液中也见大量脱落的圆形细胞;在52℃、54℃时,细胞不回缩,培养10小时后,部分培养的细胞可见边缘翘起并呈碎片状脱落,12～24小时碎片状脱落达到高峰,脱落到培养液中的细胞形态也为片状,无呈圆形回缩样改变.在46℃以上的温度,培养液中脱落细胞的总数比44℃时急剧增多,而脱落细胞中被台盼蓝着色的细胞数,则在50℃时急剧增加,说明在44℃～50℃的温度范围内,脱落的细胞尚未失去活力,结合形态学改变可能为细胞凋亡,而>50℃的温度,则细胞均被台盼蓝染色,且形态学上不再发生改变,为细胞坏死,相关的检测有待进一步研究.结论:加热会导致平滑肌细胞的生长改变,平滑肌细胞对热的反应采取三种形式,在<45℃时,细胞生长未受到明显影响;在4℃～50℃之间时,细胞以圆形或椭圆型回缩,细胞浆呈串珠样改变为主,脱落的细胞也未失去活力;>50℃细胞呈边缘翘起并以片状脱落,脱落的细胞均失去活力.可以设想在44℃～50℃的温度范围,细胞是以凋亡形式出现的,该温度范围允许我们以电磁场来体外加热已植入的支架,促进支架周围的平滑肌细胞凋亡,防治支架后的再狭窄.
