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苦参碱通过调控p53/miR-34a通路对卵巢癌细胞的增殖抑制作用
目的 探讨苦参碱对卵巢癌细胞OV2008增殖抑制作用及其对p53/miR-34a通路的影响作用.方法 应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定不同浓度(0～4.0mg/ml)苦参碱在24h、48h和72h对OV2008细胞增殖的影响;分别应用荧光定量PCR(qPCR)和蛋白免疫印记法评价苦参碱对p53/miR-34a蛋白表达的影响;应用流式细胞术(FCM)检测不同浓度苦参碱对miR-34a下游靶基因CD44、Bcl-2、c-Myc的蛋白表达水平的影响.结果 苦参碱对卵巢癌细胞OV2008增殖具有明显的抑制作用,且随着浓度的升高以及时间的延长不断增强;与对照组相比,苦参碱可增加卵巢癌细胞OV2008中miR-34a蛋白表达水平,使p53蛋白表达上调;苦参碱可使卵巢癌细胞OV2008细胞中CD44、Bcl-2、c-Myc的蛋白表达下调.结论 苦参碱对卵巢癌细胞OV2008的增殖具有明显抑制作用,且呈时间和浓度依赖性.这种抑制作用与对p53/miR-34a通路的调控相关.
关键词： 苦参碱 卵巢癌 p53/miR-34a通路 -
p53/miR-34a通路介导羽扇豆醇的抑制人膀胱癌T24细胞增殖作用
目的：：探讨羽扇豆醇对人膀胱癌T24细胞增殖的影响及对p53/miR-34a通路调控机制。方法：运用CCK-8法检测不同浓度羽扇豆醇(5~120μmol·L-1)分别作用24 h和48 h对T24细胞增殖的影响；运用CCK-8法结合Caspase抑制药确证参与羽扇豆醇诱导细胞死亡的Caspase亚型；分别运用荧光定量PCR(qPCR)和蛋白免疫印记评价羽扇豆醇对miR-34a及p53蛋白表达的影响；运用qPCR评价羽扇豆醇对miR-34a下游靶基因Bcl-2、CD44、c-Myc的mRNA表达的影响。结果： T24细胞经羽扇豆醇处理后，其细胞增殖受到明显抑制，且呈一定的剂量依赖性；药物作用24 h和48 h时羽扇豆醇的半抑制浓度(IC50)分别为(77.23±6.78)，(64.58±4.23)μmol·L-1。与对照组相比，羽扇豆醇能够使T24细胞中p53蛋白表达上调，还能够增加miR-34a表达水平，差异具有统计学意义(P<0.01)；羽扇豆醇处理后细胞内Bcl-2、CD44、c-Myc的mRNA表达量下调，差异具有统计学意义(P<0.01)。结论：羽扇豆醇具有抑制膀胱癌T24细胞增殖能力，其作用机制与调控p53/miR-34a通路有关。
关键词： 羽扇豆醇 p53/miR-34a通路 膀胱癌
