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  • 丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶3与细胞核分离基因C相互作用的研究

    作者:薄秀梅

    目的 验证丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶3(mitogen-activated protein kinase kinase kinase 3,MAPK/ERK kinase kinase 3,MEKK3)与细胞核分离基因C(Nuclear distribution gene C,NudC)的表达产物NudC相互作用的真实性,以及探讨MEKK3是否为NudC的一个上游调控激酶.方法 构建了一系列的载体,通过GST-Pull down技术,免疫共沉淀技术,从体外和体内两个方面来验证MEKK3和NudC之间能否相互作用,又利用体外模拟磷酸化实验来证明MEKK3是否为NudC的一个上游调控激酶.结果 GST-Pull down以及免疫共沉淀技术显示MEKK3和NudC在体内和体外均能够相互结合,体外模拟磷酸化实验表明在体外野生型MEKK3可以磷酸化NudC,而激酶失活型MEKK3不能.结论 MEKK3和NudC之间能够相互作用,而且MEKK3可能为NudC的一个上游调控激酶.

    关键词: MEKK3 NudC 相互作用

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