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  • 基于纳米铕核铁蛋白时间分辨荧光免疫方法的建立

    作者:张艺;黄飚;张珏;周彬;范俊

    以人铁蛋白(ferritin,FER)为材料,制备纳米铕核微粒,并建立竞争型FER免疫检测方法.用稀盐酸解离FER的亚基后,纯化脱去游离铁,再通过酸碱中和方法重组蛋白外壳,同时将铕离子包裹于去铁蛋白内,制备铕核铁蛋白.经反应条件优化,确定pH 2.0为FER适解离酸度.FER外壳重组时,铕试剂的添加量约为FER物质量的10 000倍时能获得大捕获效率.以此建立了铕核-FER时间分辨荧光免疫检测方法,其灵敏度为0.576 ng/mL,IC50为13.15 ng/mL,批间变异系数cv%<15%,非特异性结合率低.用制备成的铕核-FER构建的竞争法TRFIA与FER夹心法试剂盒对照,两者相关系数达0.966.通过上述方法获得免疫活性好、铕含量高的标记用纳米分子,简化了传统的铕标记方法,建立了构建纳米铕核铁蛋白的新方法.

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