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细胞骨架 F-actin 在层流剪切应力诱导 EPCs 内皮分化中的作用
目的 探讨细胞骨架F-actin在层流剪切应力促内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)向内皮分化中的作用.方法 对大鼠骨髓来源的EPCs施以层流剪切应力(1.2 Pa),以荧光定量RT-PCR及流式细胞术检测特异性内皮细胞标记分子vWF、CD31 mRNA及蛋白的表达来反映EPCs分化程度;以免疫荧光染色观测F-actin的排列情况;应用Ras GTPase Pull-Down方法检测Ras活性.结果 层流剪切力处理后,EPCs分化标记vWF及CD31的基因及蛋白表达较静止组明显升高(P＜0.05),细胞骨架F-actin发生重排,Ras活性明显增高.细胞骨架稳定剂Jasplakinolide (JAS)及细胞骨架松弛剂Cytochalasin D (CytoD)预处理均不同程度地抑制了层流剪切应力所致的细胞骨架的重排、Ras活性的上调及EPCs分化效应(P＜0.05),而过表达Ras则对层流剪切应力诱导的EPCs分化有明显促进作用(P＜0.05).结论 一定大小的层流剪切应力可促进EPCs向内皮细胞分化,其机制可能与层流剪切应力重塑细胞骨架F-actin,进而影响Ras活性有关;这对于揭示受损血管内皮修复的具体机制、阐明动脉粥样硬化等心血管疾病的发病机理及临床防治此类疾病具有一定的意义.
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层流剪切应力对高脂环境下白细胞-内皮细胞黏附的影响及其机制
目的：探讨层流剪切应力对高脂环境下白细胞-内皮细胞黏附的影响及其机制。方法以氧化型低密度脂蛋白造成高脂环境，诱导人脐静脉内皮细胞（HUVECs）损伤，分别以0、5、25 dyne／cm2层流剪切应力对损伤后的HUVECs干预4 h（分别记为0、5、25 dyne／cm2组）。采用人白血病淋巴瘤细胞株U937行白细胞-内皮细胞黏附试验，计算每100个HUVECs上黏附的U937细胞数；采用激光扫描共聚焦显微镜观察HUVECs细胞膜上的β1整合素抗体荧光信号强度，流式细胞术检测β1整合素阳性率。结果0 dyne／cm2组、5 dyne／cm2组和25 dyne／cm2组黏附的细胞数量依次降低（P均＜0．05），细胞膜上的β1整合素抗体荧光信号强度逐渐减弱，β1整合素阳性率分别为98．98％±0．36％、88．58％±3．34％、81．28％±5．19％；0 dyne／cm2组β1整合素阳性率明显高于25 dyne／cm2组（P＜0．05），0 dyne／cm2组与5 dyne／cm2组比较、5 dyne／cm2组与25 dyne／cm2组比较均无统计学差异（P均＞0．05）。结论在一定范围内适当提高层流剪切应力能够降低高脂环境下内皮细胞上黏附的白细胞数量，机制可能与降低内皮细胞膜β1整合素表达有关。
