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力学刺激和成骨化学诱导剂对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化能力的影响
目的:探讨力学刺激与成骨化学诱导剂对大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone mesenchymal stem cells,rBMSCs)碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、Ⅰ型胶原(collagen type Ⅰ,COL I)和骨钙素(osteocalcin,OCN)基因表达与钙化结节形成的影响.方法:体外分离培养rBMSCs,分别在成骨诱导和非成骨诱导条件下应用双轴力学应变加载系统对rBMSCs施加周期性的机械张应变(应变2%,频率1Hz,每次2h,间隔2h,每天加载3次).力学刺激作用3d和6d,采用实时荧光定量RT-PCR检测ALP、COL Ⅰ和OCN的mRNA表达,同时采用茜素红染色法观察钙化结节的形成情况.结果:力学刺激作用后,成骨诱导6d组出现明显的钙化结节,其余各组均无明显钙化结节形成.与相应非诱导组比较,成骨诱导3d组ALP、COL Ⅰ和OCN的mRNA表达量分别增加0.6、3和11.8倍;成骨诱导6d组ALP、COL Ⅰ和OCN的mRNA表达量分别增加2.7、3.2和10倍.结论:成骨化学诱导剂和力学刺激均能促进rBMSCs的骨向分化,且二者之间具有协同作用.