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碳青霉烯类抗生素耐药铜绿假单胞菌外排泵和外膜孔蛋白表达水平的研究
目的 探讨我国临床分离的碳青霉烯类抗生素耐药铜绿假单胞菌外排泵MexAB-OprM和外膜孔蛋白OprD 2 表达水平及其与碳青霉烯类抗生素耐药性之间的关系.方法 收集我国15个省市28所医院临床分离的铜绿假单胞菌655株,琼脂稀释法测定该菌加入外排泵抑制剂羟基氰氯苯腙(CCCP)前后对亚胺培南和美罗堵南的MIC;RT-PCR检测外排泵MexAB-OprM和孔蛋白OprD 2 的表达水平;十二烷基硫酸钠一聚丙酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白印迹(Western-blot)检测外膜孔蛋白OprD 2 .结果 收集到的655株铜绿假单胞菌菌株对亚胺培南和美罗培南敏感率分别为52.5%和59.2%,加入CCCP前后其对亚胺培南和美罗培南的敏感率无明显变化;52.0%(51/98)美罗堵南耐药株MexAB-OprM显著高表达(P<0.05),43.7%(59/135)亚胺培南耐药株OprD 2 显著低表达(P<0.05),14.8%(20/135)亚胺培南耐药株OprD 2 表达缺失;SDS-PAGE和Western-blot显示与标准菌株PAO1相比.OprD2 表达水平减低菌株ZZ20显影减低,表达缺失菌株BJ1不显影.结论 MexAB-OprM表达升高和OprD<.2 表达降低甚至缺失是我国铜绿假单胞菌对美罗培南和亚胺培南耐药的重要机制.
关键词: 铜绿假单胞菌 外排泵 外膜孔蛋白 羟基氰氯苯腙 实时荧光定量反转录聚合酶链反应 -
氟喹诺酮类药物对嗜麦芽寡养单胞菌的抗菌活性及羰基氰氯苯腙对其的影响
目的了解氟喹诺酮类药物(FQNs)对嗜麦芽寡养单胞菌的抗菌活性及羰基羟基氰氯苯腙(CCCP)对其抗菌活性的影响.方法采用琼脂二倍稀释法测定抗菌药物的低抑菌浓度(MIC),同时测定CCCP对FQNs的MIC值的影响.结果144株嗜麦芽寡养单胞菌对多种常用抗生素呈现多重耐药,但对SMZ/TMP、替卡西林/克拉维酸以及FQNs的耐药率较低,尤其是新型FQNs具有很高的抗菌活性,其中抗菌活性由高到低依次是加替沙星、司帕沙星、左氧氟沙星和环丙沙星.主动外排泵抑制剂CCCP在体外能增强FQNs的抗菌活性,主动外排机制不仅存在于FQNs耐药菌株,而且也存在于FQNs敏感菌株,但是CCCP对4种FQNs耐药菌株的影响更大.结论嗜麦芽寡养单胞菌的感染经验上可选用SMZ/TMP或FQNs治疗,对于严重感染可采用SMZ/TMP和替卡西林/克拉维酸联合或用新型FQNs治疗.主动外排泵抑制剂在体外的确能降低FQNs对嗜麦芽寡养单胞菌的MIC,若能保证安全性,可望用于临床克服细菌的耐药性.