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PfRON4文献资料
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恶性疟原虫红内期不同发育阶段PfRON4基因转录水平分析
目的 分析恶性疟原虫棒状体颈部蛋白4基凶(PfRON4)在红内期不同发育阶段的转录水平.方法 用山梨醇结合等渗细胞分离液(Percoll)对实验室体外培养的恶性疟原虫进行均一化处理,收集间隔为6 h不同发育阶段的疟原虫,提取RNA.根据PfRON4基凶及相关基因(PfAMA1和PfRhopH2)的序列设计特异性引物,构建标准质粒并制作标准曲线,对PfRON4及相关基因的mRNA进行定量检测分析. 结果纯化并同步后的疟原虫生长发育较为同步均一,用于定量分析的标准曲线相关性较好,PfRON4、PfAMA1和PfRhopH2的相关系数(r值)分别为-1.00、-0.98和-0.98.产物熔解曲线分析结果均显示为单一波峰.定量分析结果显示,在恶性疟原虫红内期发育过程中,PfRON4基因的转录水平在裂殖子入侵红细胞后36～40 h(即成熟裂殖体阶段)达到高峰.结论 恶性疟原虫PfRON4基因在成熟裂殖体阶段高表达.
