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  • 恶性疟原虫己糖转运体编码基因的体外扩增、克隆及表达

    作者:魏泉德;余新炳;叶苓;徐劲

    [目的]体外扩增、克隆和表达恶性疟原虫海南分离株的己糖转运体(PfHT1)基因,为研究其保护性免疫创造条件.[方法]恶性疟原虫FCC1/HN株的体外培养;碱裂解法提取基因组DNA;PfHT1基因的PCR扩增、克隆;脂质体介导法转染HEPG2细胞株及真核表达.[结果]从恶性疟原虫海南分离株基因组DNA中扩增出特异性的编码PfHT1的基因序列,片段大小为1 516 bp;成功构建pN3-HT1真核表达重组质粒并在肝癌细胞HEPG2中稳定表达.[结论]体外成功扩增、克隆恶性疟原虫PfHT1编码序列;重组质粒转染成功并获稳定表达融合蛋白的pN3-HT1/HEPG2细胞株.

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