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miR-335-5 p对高糖状态下成骨细胞功能的影响
目的：观察miR-335-5p在高糖状态下对成骨细胞增殖、凋亡的影响并探讨其分子机制。方法将MC3T3-E1成骨细胞分为正常对照组、高糖组、agomir-335-5p组及agomir阴性对照组( agomir NC组)。采用四甲基偶氮唑蓝( MTT)比色分析法测定细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡率,实时定量PCR检测细胞miR-335-5p与DKK1 mRNA的表达,Western印迹检测DKK1及caspase-3的蛋白表达水平。结果与正常对照组相比,高糖组MC3T3-E1成骨细胞miR-335-5p mRNA的表达与细胞增殖明显降低(P<0.05), DKK1、caspase-3的蛋白表达及细胞凋亡显著增加(P<0.05)。与高糖组和agomir NC组相比,agomir-335-5p组miR-335-5p mRNA的表达与细胞增殖显著增加(P<0.05),DKK1、caspase-3的蛋白表达及细胞凋亡显著减少(P<0.05)。结论高糖通过下调miR-335-5p的表达,进而上调DKK1的表达,从而抑制MC3T3-E1成骨细胞的增殖,诱导细胞凋亡。
关键词： miR-335-5p 成骨细胞 增殖 凋亡 -
脂多糖对胃癌细胞mir-146a-5p、mir-335-5p及TLR1～10受体表达的影响
目的：研究胃癌细胞在受到脂多糖干预后，TLR1～10受体及上游调控分子mir‐335‐5p和mir‐146a‐5p的表达规律。方法 PCR Array筛选结合实时荧光定量 PCR检测验证 TLR1～10 mRNA在不同分化程度胃癌细胞中的表达；实时荧光定量PCR检测不同浓度的脂多糖（终浓度分别为0．1、1．0、10．0、100．0μg／mL）干预胃癌SGC‐7901、BGC‐823细胞和GES‐1细胞12、24、48 h后，mir‐335‐5p、mir‐146a‐5p及TLR1～10的表达。结果实时荧光定量PCR检测验证表明，除 TLR1、TLR3、TLR5外，其余的Toll样受体mRNA在不同分化程度胃癌细胞中的表达相对于正常胃黏膜上皮GES‐1细胞出现明显上调；不同浓度的脂多糖干预胃癌SGC‐7901、BGC‐823细胞和GES‐1细胞12、24、48 h后，相对于未干预胃癌细胞，mi‐335‐5p和mir‐146a‐5p的表达明显下调；在SGC‐7901细胞中，除TLR3、TLR4外，其他 TLR受体在不同浓度脂多糖干预后，均有不同程度的上调表达；在BGC‐823细胞中，TLR1、TLR4、TLR6受体仅在高浓度脂多糖干预时，上调表达，其他TLR受体在不同浓度脂多糖干预后，均有不同程度的上调表达；在GES‐1细胞，所有TLR1～10在不同浓度脂多糖干预后均有明显上调表达。结论脂多糖干预胃癌细胞，可诱导mir‐335‐5p、mir‐146a‐5p下调表达和Toll样受体 mRNA上调表达，Toll样受体 mRNA上调表达可能与mir‐335‐5p、mir‐146a‐5p下调有关。
关键词： 胃癌 Toll样受体 脂多糖 miR-146a-5p miR-335-5p
