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TAZ在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义
背景与目的:TAZ(具有PDZ结合域的转录共刺激因子)是由400个氨基酸构成并与14-3-3蛋白结合,内含一个WW结构域和PDZ结合基序的转录共刺激因子,其在正常机体内参与基因转录调节和细胞信号转导.然而,近年研究发现其在多种肿瘤中表达升高,并参与肿瘤的发生、发展.本研究检测非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中TAZ mRNA及蛋白表达情况,并探讨其临床意义.方法:取58例NSCLC患者癌组织、远癌组织(距肿瘤边缘＞5 cm)和20例肺良性病变组织,并将远癌组织和肺良性病变组织作为对照组与肺癌组比较,采用实时荧光定量PCR法(real-time qPCR)和Western blot检测显示TAZ mRNA及其蛋白表达.结果:实时荧光定量PCR法检测显示,肺癌组织中TAZ mRNA的表达高于远癌及肺良性病变组织,差异有统计学意义(P＜0.05)；Western blot检测显示,肺癌组织中TAZ蛋白表达显著高于远癌及肺良性病变组织；NSCLC患者癌组织中TAZ mRNA的表达量与其肿瘤大小、分化程度和p-TNM分期相关(P＜0.05).结论:NSCLC患者癌组织中TAZ参与肿瘤的发生、发展,TAZ可作为NSCLC预后评价指标.
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抑制具有PDZ结合域的转录共刺激因子表达对结直肠癌细胞株HCT116凋亡的影响及机制
目的 探讨RNA干扰技术沉默具有PDZ结合域的转录共刺激因子(TAZ)基因表达对结直肠癌细胞凋亡的影响及其机制.方法 合成TAZ的小干扰RNA(TAZ-siRNA)以80 nmol/L转染结肠癌细胞株HCT116,抑制TAZ表达;转染48 h后细胞计数法(CCK-8)检测细胞的活性,流式细胞仪实验检测细胞凋亡率,实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western blot检测转染各组HCT116细胞TAZ、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)和细胞色素C(Cyt C)基因mRNA和蛋白表达.结果 TAZ-siRNA能有效沉默HCT116细胞TAZ基因的表达(24 h抑制率为40.5％,48 h抑制率为82.5％,72 h抑制率为69.8％).有效抑制HCT116细胞中TAZ表达后,转染组细胞的活性(1.01 ±0.12)明显低于阴性对照组和con-siRNA组(1.73 ±0.12和1.68±0.09);凋亡率在TAZ-siRNA组、阴性对照组、con-siRNA组分别为(33.20±0.35)％、(11.67±0.12)％和(12.03±0.11)％.TAZ-siRNA转染后HCT116中TAZ和bcl-2基因和蛋白表达下调,而bax和Cyt C基因表达升高和蛋白的表达上调(P＜0.05).结论 利用RNA干扰技术沉默结直肠癌HCT116细胞TAZ基因后可以显著抑制细胞的活性,并能明显促进细胞凋亡,其机制可能是TAZ通过调控线粒体相关凋亡途径影响细胞凋亡.
关键词： 结直肠癌 具有PDZ结合域的转录共刺激因子 基因干扰 脱噬作用
