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  • siRNA干扰ERCC2表达对食管癌细胞紫杉醇敏感性的影响

    作者:王玉栋;崔志英;左静;冯莉;吕雅蕾;刘巍

    背景与目的:通过siRNA干扰沉默ERCC2基因,观察食管癌细胞株对紫杉醇敏感性的改变,初步探讨新的紫杉醇耐药可能机制.方法:体外合成靶向ERCC2的SiRNA(si-ERCC2);应用脂质体法瞬时转染ERCC2高表达细胞株KYSE150;应用RT-PCR和流式细胞术(FCM)分别检测转染组细胞点ERCC2 ndlNA和蛋白的表达水平:应用MTT法检测转染前后细胞对紫杉醇敏感性的变化.结果:si-ERCC2组在转染后24、48、72 h均未测出ERCC2特异性条带且ERCC2蛋白表达量分别下调了31.2%,51.6%和60.0%.si-ERCC2组紫杉醇IC_(50)值为6.3±0.9 μg/mL,较对照组降低49%.结论:siRNA成功封闭了目的基因ERCC2在转录和翻译水平的表达,封闭ERCC2表达能部分逆转紫杉醇耐药现象.

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