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  • 有限稀释法分选人骨肉瘤143-B干细胞及鉴定

    作者:毛德举;胡旭;张莹;沈伟伟;陈武桂;陈培;何建荣;卓云云;张超

    目的:探索人骨肉瘤143-B干细胞的分选及鉴定方法.方法:采用有限稀释法对143-B细胞进行干细胞的分选,并检测所获取细胞表面干细胞标志物Nanog和OCT4的表达水平;对所获取的细胞进行成骨及成脂诱导分化,以检测其是否具有多向分化的潜能;动物成瘤实验鉴定细胞的成瘤能力,耐药实验检测顺铂对细胞半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50)的影响.结果:分选获得的单克隆143-L细胞具有较高的成球能力;143-L细胞表面Nanog和OCT4 mRNA和蛋白的表达水平均明显高于亲代143-B细胞;对其进行成骨及成脂多向诱导分化成功.143-L细胞的成瘤能力及耐药能力(顺铂对143-B及143-L细胞的IC50值分别为0.83和2.51 μg/mL)均明显高于143-B细胞.结论:有限稀释法可以用于143-B细胞干细胞的分选.