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富血小板纤维蛋白凝胶三维结构及其对人牙髓细胞体外增殖的影响
目的:分析富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin,PRF)凝胶的三维结构,并探索不同浓度PRF凝胶析出液对人牙髓细胞(human dental pulp cells,hDPCs)体外增殖的影响,评价PRF凝胶作为牙髓组织再生支架的可行性.方法:采用Choukroun一步离心法,制备PRF凝胶,分别行组织学和扫描电镜(SEM)观察.将新鲜制备的PRF凝胶浸泡于DMEM培养基中,于第7天取出析出液.分别用含PRF凝胶析出液浓度(体积分数)为25％(1PRF组)和75％(3PRF组)的DMEM培养基培养hDPCs.采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测24、48、72、96、120、144、168 h各时间点的细胞增殖活性.采用SPSS16.0软件包对数据进行统计学处理.结果:光镜和SEM观察结果均表明,血小板和白细胞主要分布在PRF凝胶的白膜层,此层由粗大而密集的纤维蛋白条索构成.CCK-8结果显示,在24、48、72、96 h,1PRF组和3PRF组的光密吸光度(OD)值与对照组相比,差异无显著性(P＞0.05);在120、144、168 h,1PRF组和3PRF组的光密度值显著高于对照组(P＜0.05);1PRF组的OD值和3PRF组相比,差异无显著性(P＞0.05).结论:PRF凝胶的三维结构由纤维蛋白网构成,其白膜层聚集了大量可释放生长因子的血小板与白细胞;PRF凝胶析出液对hDPCs体外增殖的促进作用具有时间依赖性,提示PRF凝胶有望成为牙髓再生的良好支架材料.
关键词： 富血小板纤维蛋白凝胶 三维结构 人牙髓细胞 -
富血小板纤维蛋白凝胶析出液对人牙髓细胞体外矿化的影响
目的：探索富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin,PRF)凝胶析出液对人牙髓细胞(human dental pulp cells, hDPCs)体外矿化的影响。方法组织块法培养 hDPCs。采用 Choukroun 一步离心法制备 PRF 凝胶。将新鲜制备的PRF 凝胶浸泡于 DMEM 培养基中,于第7 d 取析出液。用 PRF 凝胶析出液孵育 hDPCs 3 d 后更换矿化诱导液。采用茜素红染色和 RT-PCR 检测人牙髓细胞矿化的潜能。结果矿化诱导21 d 后,茜素红染色观察到实验组有少量钙结节生成,而对照组无钙结节生成；RT-PCR 结果显示,实验组 hDPCs 碱性磷酸酶(ALP)的表达为对照组的1.5倍,差异具有统计学意义(P <0.05)。结论 PRF 凝胶析出液可促进人牙髓细胞矿化。
关键词： 富血小板纤维蛋白凝胶 析出液 人牙髓细胞 矿化
