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镀氮化钛膜钕铁硼磁体细胞毒性的实验研究
目的:观察镀氮化钛膜N48钕铁硼磁体对小鼠L929成纤维细胞生长和凋亡的影响,评价该材料的生物相容性.方法:将镀氮化钛膜及未镀膜的钕铁硼磁体、普通托槽加入:RPMI-1640培养液中,制备浸提液.分别用阴性、阳性对照液,以及100%、50%、25%镀氮化钛膜样品的浸提液培养小鼠L929成纤维细胞,通过MTT法检测细胞增殖活力,并计算相对增殖率.采用流式细胞仪Annexin V/PI双染法检测观察阴性对照液、100%氮化钛膜及未镀膜的钕铁硼磁体浸提液组细胞的散点图,并计算各组正常、早期凋亡、晚期和坏死细胞的比例.采用SPSS11.5软件包对结果进行配对t检验.结果:镀氮化钛膜磁体的细胞毒性为0～1级;未镀膜磁体的细胞毒性为2级.流式细胞仪散点图发现,空白对照和镀氮化钛膜磁体组散点图显示大量的活细胞集中于左下象限;未镀膜磁体组散点图显示右下象限有大量的早期凋亡细胞.镀氮化钛膜磁体组与空白对照组之间活细胞、早期凋亡、晚期凋亡及坏死细胞含量差异无统计学意义(P＞0.05);未镀膜磁体组与空白对照组之间不同时期的细胞含量差异有显著性(P＜0.01).结论:镀氮化钛膜钕铁硼磁体有良好的生物相容性.
关键词： 氮化钛 钕铁硼磁体 细胞毒性 凋亡 小鼠L929成纤维细胞 -
不同血清浓度对小鼠成纤维细胞L929生长增殖和胶原蛋白分泌的影响
目的:观察不同血清浓度对小鼠L929成纤维细胞生长增殖和分泌Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和羟脯氨酸的影响,以了解适宜成纤维细胞生长和分泌的佳血清浓度.方法:L929细胞分成6组:分别以血清浓度为0 mL/L、200 mL/L、400 mL/L、600 mL/L、800 mL/L和1 000 mL/L的培养液培养,培养2 d、4 d、6 d和8 d分别取各组细胞进行HE和吖啶橙荧光染色,了解细胞形态和生长状况变化.在2 d、4 d、6 d和8 d分别取各组上清,酶联免疫法检测Ⅰ型胶原,Ⅲ型胶原,羟脯氨酸水平.磺基罗丹明B(SRB)法检测培养2 d、4 d、6 d和8 d后各组细胞增殖情况.结果:(1)L929在血清浓度很高和很低(0%和100%)时细胞增殖率都明显下降,20%组血清浓度的增殖率高;40%～100%组,随着血清浓度增高,细胞增殖率反而下降;(2)HE和AO染色发现0%血清浓度组细胞出现凋亡情况,80%组细胞开始出现空泡化,100%血清浓度时细胞空泡化严重.20%～60%血清浓度细胞形态基本正常.(3)0%、80%和100%血清浓度在培养的8 d内Ⅰ型胶原浓度一直比较低,40%血清浓度Ⅰ型胶原浓度高.培养的第2天,各浓度组的Ⅲ胶原均有增加,后有所下降,6～8 d时又再次上升.各组血清浓度组的L929细胞在不同培养时间羟脯氨酸浓度变化不大.结论:20%～40%血清浓度适合成纤维细胞的生长,增殖和胶原分泌,血清浓度过高或过低都会引起细胞增殖率下降、细胞凋亡、空泡化和胶原的分泌减少,自体血清注射时采用合适的血清浓度可能会取得更好的效果.
关键词： 小鼠L929成纤维细胞 细胞增殖 Ⅰ型胶原 Ⅲ型胶原 羟脯氨酸
