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GDNF基因体内转染对大鼠脊髓损伤后轴突再生的影响
目的:研究脂质体介导的胶质细胞源性神经营养因子(GDN F)基因在大鼠损伤脊髓内的表达,观察外源性GDNF对损伤脊髓轴突再生的作用. 方法:利用Nystrm法制备大鼠胸髓压迫损伤模型.以直接注射法将脂质体DC- Chol和重组质粒pEGFP-GDNF cDNA混合后注入大鼠损伤脊髓.采用RT-PCR技术和荧光显微镜检测GDNF基因转染后的体内表达,并通过辣根过氧化酶(HRP)顺行追踪技术和神经微丝 (NF)、胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)免疫组化活性的变化来评价GDNF基因转染对轴突再生的影响.结果:经脂质体DC-Chol介导GDNF基因可有效地转染脊髓组织并得到表达.GDNF转基因4周后可明显增加NF阳性轴突数目,促进皮质脊髓束再生并通过损伤区.结论:外源性GDNF在损伤区局部高表达具有神经损伤保护作用,提示阳离子脂质体介导GDNF体内转基因治疗创伤性脊髓损伤的方法是可行的.
关键词: 脊髓损伤 胶质细胞源性神经营养因子 脂质体 基因治疗 法 神经再生