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软骨来源形态发生蛋白-1文献资料
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从人软骨提取总RNA和CDMP-1成熟肽片段的克隆
目的 克隆人软骨来源形态发生蛋白-1(CDMP 1)成熟肽编码区的基因片段。方法用异硫氰酸胍一步法从人软骨组织和酶消化法原代培养的软骨细胞中分别抽提总RNA,利用RT-PCR方法扩增出人CDMP-1成熟区的基因片段(约1.0kbp),将所得基因片段插入pBluescript质粒载体,重组质粒DNA,通过酶切分析和核苷酸序列分析鉴定阳性克隆。结果从软骨组织直接抽取到总RNA,其质量与从等重量软骨组织中的原代软骨细胞所抽取的基本一致,人CDMP-1酶切图谱正确,测序得到的部分序列与基因库公布序列一致。结论从软骨组织可以直接抽取总RNA,克隆到人CDMP-1成熟肽编码区的基因片段。
关键词: 软骨来源形态发生蛋白-1 反转录聚合酶链反应 软骨组织