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条件性基因剔除小鼠文献资料
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Sumf2条件性基因剔除小鼠模型的建立及初步表型分析
目的 建立Sumf2条件性基因剔除小鼠模型,为整体水平研究Sumf2基因的生物学功能创造条件.方法 运用生物信息学,采用ET克隆、同源重组、显微注射等技术成功建立Sum f2条件性基因剔除小鼠模型,并通过该模型与EIIa-cre转基因小鼠交配,获得Sumf2基因剔除小鼠模型,通过PCR、RT-PCR、Western Blot等方法在不同水平验证Sumf2基因的表达;对该小鼠模型进行初步的表型分析.结果 经胚胎干细胞打靶,获得19个正确同源重组的克隆,重组效率为20％;阳性克隆经囊胚注射,获得2只嵌合体雄鼠;嵌合雄鼠与C57BL/6J小鼠交配,获得28只灰鼠,经PCR鉴定16只为杂合子小鼠,阳性率为57％;与EIIa-cre转基因小鼠交配,获得了Sum f2基因剔除小鼠模型,DNA、RNA及蛋白水平证明该基因已成功剔除;初步的表型观察未发现Sum f2基因剔除小鼠生长发育、血常规及血生化指标等出现异常改变.结论 成功建立Sum f2条件性基因剔除小鼠模型,该基因纯合缺失未发现明显的生长发育异常,为进一步的基因功能研究奠定了基础.
