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SPATA5L1文献资料
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SPATA5L1真核表达载体的构建及其对KB细胞增殖和迁移的影响
目的：通过构建过表达质粒并筛选稳定细胞株，研究SPATA5L1基因对KB细胞增殖和迁移的影响。方法 PCR扩增SPATA5L1基因全长，用载体pEX-1构建重组质粒，测序成功后转染人口腔癌KB细胞，并设空载体作对照，经过G418压力筛选后获得单克隆细胞株，Real-time PCR、Western blot验证SPATA5L1基因的表达，光镜观察SPATA5L1对KB细胞形态的影响，CCK-8法检测细胞增殖情况，划痕实验观察细胞迁移能力。结果测序结果显示质粒构建成功，经过G418压力筛选所得到的稳定表达细胞株，在转录水平和蛋白水平均检测到目的基因的高表达，且细胞由正常状态下的多边形变为梭形，细胞增殖能力和体外迁移能力明显提高（P＜0.05）。结论成功构建pEX-1-SPATA5L1表达载体并获得稳定细胞株，过表达SPATA5L1蛋白能使KB细胞形态变长，增殖和迁移加快。
