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西安市市售8种卫生杀虫气雾剂对家蝇的灭效观察
目的作者采用玻璃柜喷雾法,对市售8种卫生杀虫气雾剂杀灭家蝇的效果进行了测试,结果KT50在0.45分钟～1.24分钟之间,24小时死亡率均为100%.其中金博杀虫气雾剂、"彩虹"轰炸机杀虫气雾剂、枪王杀虫剂的击倒速度明显高于其它卫生杀虫气雾剂.
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气雾杀虫剂对家蝇的杀灭效果观察
近年来随着人们生活水平的提高,气雾杀虫剂已广泛被人们所接受,今后还将成为家庭用药的主流.为摸清市场销售气雾杀虫剂对本市家蝇的杀灭效果,我们对太原市销售的部分气雾杀虫剂进行了对家蝇杀灭效果的试验.现将结果报告如下.
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华北部队部分驻地家蝇对溴氰菊酯和敌敌畏的抗性调查
随着化学杀虫剂在家蝇防治中的长期广泛应用,其抗性问题日益发展,越来越严重的影响我们对其的防治力度.在长期的害虫防治工作中,基层部队或多或少存在着长期单一或使用同一类药物、盲目施药和滥用药物等不够合理的情况.利用抗药性监测数据研究本地区家蝇对多种杀虫剂的交互抗性,指导混配药物和筛选敏感药物,可以为科学合理用药提供依据.我们于2002年5月～9月份,采集华北部队部分驻地周围的家蝇样本,采用微量点滴法对溴氰菊酯、敌敌畏2种目前常用的杀虫剂进行了抗药性测定.
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溴氰菊酯抗性家蝇酯酶的生化分析
为研究拟除虫菊酯抗性机制,通过对溴氰菊酯敏感、抗性和高抗性家蝇的离体酯酶活力测定、酶反应动力学及不连续非变性凝胶电泳,观察酯酶在拟除虫菊酯抗性中的作用.结果显示,用α-NA做底物酯酶活力和Vm在三种品系家蝇中没有差异,两个抗性品系之间Km和Vm也没有差异,但敏感品系的Km分别高于两抗性品系;聚丙烯酰胺凝胶电泳表明其同功酶谱差异很大,SS有6条带,R、RR各有5条副业,且三者之间带的位置和带型均发生改变.结论,拟除虫菊酯抗性家蝇酯酶性质发生改变,可能参与对拟除虫菊酯的代谢抗性.
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河北省唐山市家蝇抗性水平调查
目的 了解唐山市家蝇对常用杀虫剂的抗药性情况,为科学合理使用杀虫剂提供依据.方法 采用微量点滴法,检测唐山市家蝇野外种群对胺菊酯、氯氰菊酯、顺式氟氰菊酯、高效氟氯菊酯、甲基吡恶啉等杀虫剂的抗药性水平.结果 唐山市家蝇对胺菊酯、高效氟氯氰菊酯、顺式氯氰菊酯、甲基吡恶磷的抗性系数为低抗性级别;溴氰菊酯为高抗性级别.结论 应根据抗药性调查结果科学合理使用杀虫剂.
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献县家蝇对常用杀虫剂抗药性调查及防制对策
目的 了解献县家蝇对溴氰菊酯等常用杀虫剂的抗性现状,为合理选用化学杀虫剂、指导家蝇防制提供科学依据.方法 采用点滴法,测定家蝇半数致死量(LD50).结果 献县家蝇对4种常用杀虫剂的LD50依次为溴氰菊酯0.49 590 μg/只、高效氯氰菊酯0.01990μg/只,敌敌畏0.05 376μg/只,残杀威0.03 393 μg/只,与敏感试虫相比,抗性系数(R/S值)溴氰菊酯为43.50倍、高效氯氰菊酯为33.17倍、敌敌畏为6.48倍、残杀威为54.73倍.结论 献县家蝇对4种杀虫剂均产生不同程度的抗药性,与卫生城市创建等工作中杀虫剂的不合理使用有关;建议加强抗性监测,合理选择用药,采取综合防治措施,以缓解家蝇抗药性的发展.
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两种化学杀虫剂防制家蝇和德国小蠊效果观察
目的 通过试验,测定残杀威和高效氯氰菊酯防制家蝇和德国小蠊的效果.方法 实验室试验参照GB13917.1-92和GB/T17322.1-1998;现场试验分别应用5%的高效氯氰菊酯和20%残杀威制剂滞留喷洒.结果 实验室结果表明,三种表面的室内滞留用药药效均达到A级标准.现场试验结果表明,用药45和60天,高效氯氰菊酯杀虫效力明显下降,而20%残杀威效果下降缓慢.结论 20%残杀威对家蝇和蟑螂杀灭效果稳定,持效时间长,其优点较5%的高效氯氰菊酯好.
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绵阳市城区家蝇对常用杀虫剂的抗药性调查分析
目的 了解绵阳市城区地震后家蝇对常用杀虫剂的敏感性,为杀虫剂的合理使用提供科学依据.方法 按照《全国重要病媒生物抗药性监测(试行)方案》,采用点滴法进行测定.结果 绵阳市城区家蝇对主要化学杀虫剂的半数致死量(LD50)值分别为:敌敌畏0.343 ug/只、高效氯氰菊酯0.221 ug/只、溴氰菊酯0.165 ug/只;抗性系数分别为:敌敌畏68.6、高效氯氰菊酯11.05、溴氰菊酯23.57.结论 绵阳市城区家蝇对主要化学杀虫剂敌敌畏、高效氯氰菊酯和溴氰菊酯均产生不同程度的抗性.抗性调查的结果为指导合理使用卫生杀虫剂、延缓家蝇抗药性的增强提供了科学依据.
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云南省保山市家蝇抗药性监测初步研究
目的 了解保山市家蝇对常见杀虫剂的抗药性状况,为保山市蝇类控制中杀虫剂的选择和使用提供科学依据.方法 用点滴法测定家蝇对常用杀虫剂抗性情况.结果 高效氯氰菊酯、溴氰菊酯、敌敌畏、DDT LD50分别为0.2869、0.0 824、0.3 054、0.5 927μg/虫,仲丁威、残杀威均＞5％.结论 对保山市家蝇抗药性初步研究显示,保山市家蝇对5种杀虫剂均产生了抗性,除敌敌畏高抗外,对其余5种杀虫剂均为高抗,需开展进一步研究.
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不同抗性培育下家蝇乙酰胆碱酯酶活性变化
目的探讨不同种类杀虫剂在不同施药方式下对家蝇的作用机制.方法分别在幼虫期和成虫期对家蝇施加杀虫剂,测量不同世代家蝇的半数致死量(LD50)并计算抗性指数,测量不同抗性水平下家蝇乙酰胆碱酯酶的活性.结果施加敌敌畏的2个品系家蝇乙酰胆碱酯酶(AChE)活性升高明显,施加高效氯氰菊酯的2个品系乙酰胆碱酯酶活性先升高后下降;幼虫期施加杀虫剂的品系抗性水平升高较快.结论乙酰胆碱酯酶是敌敌畏作用于家蝇的靶标;幼虫期施加杀虫剂抗性增加较快,因此,在家蝇的防治过程中应尽量避免在幼虫期施加杀虫剂.
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家蝇对化学杀虫剂抗药性及抗性自然衰减趋势
目的 研究家蝇自然种群对化学杀虫剂的抗药性现状及其在实验室环境下抗性自然衰减的变化趋势,为抗性治理提供理论依据.方法 将野外采集的家蝇自然种群在实验室进行正常饲养.用点滴法测定其不同世代(F1～F21代)对氯氰菊酯、溴氰菊酯和敌敌畏3种杀虫剂的敏感性.结果 该家蝇种群对氯氰菊酯、溴氰菊酯和敌敌畏均有不同程度的抗药性.抗性系数分别为21.52,43.33,28.42,在实验室环境条件下饲养21代,抗性系数分别为10.22,11.67,4.03,抗性水平有不同程度衰减,但仍未恢复到敏感水平.结论 该家蝇种群对氯氰菊酯、溴氰菊酯和敌敌畏的抗药性衰减缓慢.对不同种类杀虫剂抗性的稳定性差异有统计学意义.
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家蝇对氯氰菊酯抗性的风险评估与预报
目的评估家蝇(Musca domestica)对氯氰菊酯抗性风险,预测抗性发展速率.方法采集自然种群家蝇带回室内饲养,采用点滴法用氯氰菊酯筛选抗性品系,测定LD50;采用Tabashnik的方法测定抗性遗传力和预测抗性发展速率.结果家蝇在室内饲养并用氯氰菊酯连续筛选了10代,平均存活率54.5%,抗性上升了50倍.测得抗性遗传力h2为0.157 7.据此预测在50%～90%的杀死率的选择压力下,要获得10倍的抗性仅需2.2～4.8代.结论家蝇对氰氰菊酯抗性上升迅速,10代内抗性遗传力基本稳定.
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家蝇对DDVP抗性的生物化学标记的探索
目的探讨家蝇对DDVP抗性与乙酰胆碱酯酶敏感度和羧酸酶活性的关系,并探索家蝇对DDVP抗性生物化学标记,应用于家蝇抗药性的早期检测.方法用乙酰胆碱酯酶对DDVP的敏感度作为家蝇抗性的生物化学标记检测了北京4个城区家蝇种群中具有不敏感乙酰胆碱酯酶个体的频率及其季节变化.结果丰台区家蝇种群中到10月份具有不敏感乙酰胆碱酯酶个体的频率明显高于其它3个城区;海淀区具有不敏感乙酰胆碱酯酶的个体频率低,一年中的变化也明显低于丰台区.西城区家蝇种群与海淀区比较接近,而朝阳区的种群则更接近于丰台区种群.结论用药剂对CarE的抑制能力和AchE的敏感度作为家蝇对DDVP抗性的生物化学标记监测家蝇抗药性的变化是可行的.
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诱导家蝇幼虫抗菌蛋白的提取及动力学研究
目的比较两种方法提取家蝇幼虫抗菌蛋白抑菌活性,并观察两种诱导源所诱导家蝇幼虫血淋巴中抗菌蛋白产生的动力学变化.方法用金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌诱导家蝇幼虫,在诱导后12,24,36,48,60 h收集家蝇幼虫,80℃热水处死,分别用血淋巴、组织匀浆提取抗菌蛋白后进行抗菌活性的测定.结果用组织匀浆提取的抗菌蛋白抑菌效果明显好于血淋巴;金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌诱导家蝇幼虫产生抗菌物质达大活性时间分别为诱导后48,36 h.结论用组织匀浆提取家蝇幼虫抗菌蛋白是一种较好的方法;诱导后36～48 h的抗菌蛋白活性大.
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家蝇溶菌酶MDLZM基因克隆、表达和序列分析
目的 探讨家蝇溶菌酶(MDLZM)基因及编码的蛋白质结构和特征.方法 利用美国国家生物技术信息中心和瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统中有关基因和蛋白序列的分析工具,结合其他生物信息学分析软件包,从GenBank上家蝇基因组序列识别出编码MDLZM的基因,分析预测该蛋白质的结构功能;设计引物PCR扩增MDLZM基因,将其克隆到原核表达质粒PEASY-E1中,重组质粒在大肠杆菌中的表达产物用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定.结果 MDLZM基因序列大开放阅读框(ORF)为435 bp,编码145个氨基酸,理论分子量为15 958.4 Da,等电点为8.65;构建的重组质粒经PCR、双酶切及测序鉴定确为MDLZM基因;SDS-PAGE分析结果显示,重组质粒可在大肠杆菌OrigmiB/DE3中表达,表达产物纯化后得到的融合蛋白相对分子质量约为15958.4 Da,诱导18 h蛋白表达量高,SDS-PAGE鉴定得到的蛋白条带与目的蛋白大小相符.结论 成功构建PEASY-E1-MDLZM重组原核表达质粒并表达出融合MDLZM蛋白.
关键词： 家蝇 家蝇溶菌酶(MDLZM) 克隆 表达 序列分析 -
家蝇伴侣蛋白CCT η基因序列分析与表达模式
目的 对家蝇伴侣蛋白CCT η(MD-CCT η)基因进行序列分析,克隆其cDNA序列并检测家蝇CCTη基因的表达情况.方法 采用表达序列标签(EST)测序技术从已构建的家蝇幼虫cDNA文库中筛选MD-CCTη基因,对其进行序列测定和分析;提取家蝇3日龄幼虫RNA,逆转录cDNA为模板,PCR扩增,并与pMD-19T载体连接,转化大肠杆菌DH5α中;采用实时荧光PCR技术分析MD-CCT η基因在家蝇不同生长发育阶段及3日龄幼虫组织中表达模式.结果 MD-CCT η基因开放阅读框(ORF)全长1 632 bp,编码543个氨基酸,理论分子量59.3kDa,等电点6.27;该基因推导的氨基酸序列与其他昆虫同源序列比较有较高的相似性(93％),聚类分析结果显示,家蝇与地中海实蝇和果蝇的亲缘关系近(100％);MD-CCT η在发育阶段以卵期表达量高,其次为1日龄幼虫,雄性成虫表达量低;MD-CCTη基因在家蝇3日龄幼虫组织中气管表达量高,其次为唾液腺,在体壁中表达量低.结论 成功克隆出MD-CCTη基因的cDNA序列,MD-CCTη在家蝇不同发育阶段及组织中表达模式存在明显差异.
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油田矿区家蝇抗性及防制策略分析
目的 探讨胜利油田矿区家蝇抗药性现状和防制对策.方法 捕蝇笼采集试虫,在实验室饲养1～2代进行点滴法生物测试,并测定蛋白质含量和相关酶的活性.结果 油田矿区家蝇对溴氰菊酯、高效氯氰菊酯和氯菊酯具有高抗性,抗性系数(R/S)分别为22.86、24.12和19.37;对敌敌畏的抗性有衰退趋势.家蝇经高效氯氰菊酯抗性选育后,AchE、CAT、GST的活性均明显增加,分别为9.012、10.012和421.35 U/mgprot.在无选择压力下,家蝇高效氯氰菊酯抗性种群会出现抗性自然衰退趋势.结论 实施以环境治理为主的综合防制措施,定期开展家蝇抗药性监测,合理使用杀虫剂,抑制和延缓抗性发展.
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抗菌肽attacin重组杆状病毒表达载体构建
抗菌肽广泛存在于动、植物中,在生物体内发现的抗菌肽已超过2 000种,昆虫抗菌肽已多达200多种[1],其中一些抗菌肽的基因、结构、生物学效应及作用机制已经阐明.抗菌肽抗菌谱广,对肿瘤细胞、病毒、真菌等均有杀伤作用,甚至对弓形虫等原虫也有抑制作用[2],但对正常的真核细胞无毒或低毒,且不易产生耐药性[3].
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试验用家蝇室内标准化养殖效果评价
家蝇是重要的病媒生物防制对象[1],其体内、外携带多种致病微生物,能够污染食品、危害人们的身体健康[2],影响人们的正常生活[3].由于家蝇繁殖力和抗逆性强等优势[4-5],且其室内养殖技术易于掌握,重现性好,其已成为实验室常用的试验昆虫之一.建立标准的实验室养殖技术、规范家蝇养殖程序是进行杀虫剂登记、统一国内评价标准的前提.本研究以国标规定试验用蝇的体重为衡量指标,确定室内养殖家蝇的环境条件及操作规范,以期为家蝇室内养殖提供标准化的程序规范.
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家蝇对杀虫药剂敏感性的实验研究
采用微量点滴法测定家蝇对拟除虫菊酯杀虫剂胺菊酯和醚菊酯、有机氯杀虫剂三氯杀虫酯、有机磷杀虫剂辛硫磷、氨基甲酸酯杀虫剂仲丁威和残杀威6种药物的敏感性.实验结果表明,苏州市家蝇野生品系对胺菊酯和醚菊酯的敏感性下降幅度大,抗性指数分别达6.24和2.43;对三氯杀虫酯和辛硫磷的敏感性也呈下降趋势,与家蝇敏感品系相比,其抗性指数分别为2.07和1.93;对仲丁威和残杀威的抗性指数分别为1.37和1.03.苏州市家蝇野生品系对所测试的6种杀虫剂的敏感性均呈不同程度下降趋势,可能与杀虫剂间的交互抗性有关.
