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甲基敏感扩增多态性技术文献资料
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邻苯二甲酸二(2-乙己基)酯致小鼠睾丸基因组DNA甲基化水平变化分析
目的:探讨增塑剂邻苯二甲酸二(2-乙己基)酯(DEHP)作用于怀孕小鼠后,其仔代睾丸基因组DNA甲基化水平的改变情况. 方法:妊娠KM小鼠随机分为3组:正常对照组、玉米油对照组和DEHP实验组.自妊娠12.5 d到生后第3天分别持续经口予以玉米油和DEHP[500 mg/(kg·d)],于生后第7天取仔代睾丸,应用甲基敏感扩增多态性(MSAP)技术,对仔鼠睾丸组织DNA进行EcoR Ⅰ/Msp Ⅰ和EcoR Ⅰ/Hpa Ⅱ两种酶切反应,经ABI 3730DNA自动测序仪电泳及检测后,运用Genescan3.1分析扩增谱带. 结果:对CCGG位点,DEHP实验组小鼠仔代睾丸组织DNA甲基化程度明显增高,其甲基化水平为(34.03±3.05)%;而正常对照组和玉米油对照组小鼠仔代睾丸组织基因组DNA甲基化程度分别为(28.37±2.37)%和(28.58±2.45)%.DEHP实验组与正常对照组和玉米油对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05). 结论:DEHP作用孕鼠后可导致仔代睾丸基因组DNA甲基化水平改变,影响基因组表观遗传修饰改变,可能是导致生殖系统损害的重要毒理机制之一.
