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DAZL基因多态性位点(A260G、A386G)与无精子症和少精子症的关联性Meta分析
目的:探讨DAZL基因多态性位点(A260G,A386G)与无精子症和少精子症导致男性不育的关联性.方法:计算机检索PubMed、Science direct、Wiley online library、中国知网、维普中文科技期刊数据库、万方数据库,查找并筛选出研究DAZL基因多态性位点A260G和A386G与男性不育关系的病例对照研究,同时查阅检索结果中所附相似文献及参考文献,检索时限均为各数据库建库至2013年11月30日.由2名评价员单独进行文献筛选及资料提取,采用StataSE 12.0软件进行Meta分析以及其他相关统计学分析. 结果:共纳入文献13篇(A260G位点多态性10篇,A386G位点多态性11篇);男性不育患者共2 715例,其中少精子症或无精子症患者共2 500例,健康对照1 835例.Meta分析结果显示,DAZL A260G位点多态性在等位基因模型、显性基因模型、隐性基因模型、共显性基因模型、超显性基因模型差异无统计学意义(P＞0.05).而DAZL A386G位点多态性的分析表明,亚洲人中DAZL A386G位点多态性与少精子症或无精子症在等位基因模型、显性基因模型、共显性基因模型(AA/AG)和超显性基因模型下整体效应差异有统计学意义:等位基因模型优势比(OR) =0.15,95％可信区间(CI) 0.07～0.34,P＜0.05;显性基因模型OR =0.16,95％ CI 0.07 ～ 0.35,P＜0.05;共显性基因模型(AA/AG) OR =0.15,95％CI0.06 ～ 0.33,P＜0.05;超显性基因模型OR=0.15,95％CI 0.06～0.33,P＜0.05.地区亚组分析结果显示,中国A386G位点多态性与少精子症或无精子症患者在等位基因模型、显性基因模型和超显性基因模型下总效应差异有统计学意义:等位基因模型OR =0.11,95％ CI 0.04 ～ 0.28,P＜0.05;显性基因模型OR =0.11,95％ CI 0.04～0.28,P＜0.05;共显性基因模型(AA/AG) OR =0.09,95％ CI 0.03 ～ 0.26,P＜0.05;超显性基因模型OR=0.09,95％ CI 0.03～ 0.26,P＜0.05. 结论:DAZL A260G位点多态性与精子生成或精子数量下降无相关性,而DAZLA386G位点多态性与精子生成或精子数量下降有相关性,而在地区亚种分析和人种亚组分析中这种相关性只在中国存在,因此探求DAZL A260G和A386G基因多态性与无精子症或少精子症导致的男性不育之间的相关性需要更多高质量的研究.
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DAZL腺病毒载体的构建及其对人脐带间充质干细胞向男性生殖细胞诱导分化的影响
目的 构建高效表达的DAZL重组腺病毒载体系统,观察DAZL基因对人脐带间充质干细胞(HUMSCs)向男性生殖细胞分化的影响.方法 1.用Gateway腺病毒系统制备含DAZL及EGFP基因的重组腺病毒pAd-DAZL-EGFP.2.用组织块贴壁法获得HUMSCs,用Ad-EGFP-DAZL感染第3代生长良好的HUMSCs,观察感染效率及细胞生长情况,确定佳感染复数(MOI)和感染时间.3.通过形态学、反转录(RT)-PCR和免疫荧光鉴定DAZL基因异位表达诱导HUMSCs向男性生殖细胞方向分化的结果.结果 成功构建表达DAZL的腺病毒,病毒滴度为1.0×109 pfu/mL.佳的感染条件为:MOI=100,感染时间=8h,该条件下的感染率为(43.00±1.52)％.HUMSCs在感染DAZL重组腺病毒后形态发生了明显的变化,第4-6天由成纤维细胞变成圆形,少数变圆的细胞在2～3周后变成蝌蚪状,阴性对照组及空白对照组细胞则未发生类似变化.RT-PCR和免疫荧光均证实实验组表达精原细胞的标志STELLA(DDPA3)、VASA(DDX4)、c-kit、DAZL和OCT4(POU5F1),阴性对照组及空白对照组则只表达内参基因.结论 DAZL重组腺病毒感染HUMSCs后能诱导HUMSCs向男性生殖细胞方向分化,证实DAZL基因是精子形成过程中的关键基因.
