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miR?509?3p对头颈鳞状细胞癌细胞CAL27增殖的影响
目的:探讨miR?509?3p对头颈鳞状细胞癌(HNSCC)细胞CAL27增殖的调控作用.方法:实时定量RT?PCR检测HNSCC系HN4、HN6、HN13、CAL27和正常口腔上皮细胞系HOK中miR?509?3p的表达差异.应用miR?509?3p mimic和mimic NC转染CAL27细胞,实时定量RT?PCR检测miR?509?3p表达水平;使用CCK8、克隆形成和Edu等实验技术验证miR?509?3p表达水平变化对CAL27细胞增殖能力的影响;Western blot法检测miR?509?3p表达水平变化对EGFR/PI3K/AKT/MTOR信号通路中各蛋白水平的影响.结果:与HOK细胞株相比,miR?509?3p在HNSCC系内表达量明显下调;miR?509?3p mimic显著提高CAL27中miR?509?3p的表达;过表达miR?509?3p能明显抑制CAL27细胞的增殖能力;Western blot结果显示,转染miR?509?3p mimic的CAL27中,表皮生长因子受体(EGFR)、磷酸化表皮生长因子受体(p?EGFR)、磷酸肌醇3激酶(PI3K)、 磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p?AKT)、磷酸化的哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p?MTOR)的表达水平均明显降低.结论:miR?509?3p可能通过调控EGFR/PI3K/AKT/MTOR信号通路影响HNSCC细胞CAL27的增殖能力.