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乳胶免疫层析文献资料
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HIV-1型gp41抗原蛋白在大肠杆菌无细胞体系中的表达和免疫反应性检测
HIV-1型gp41抗原蛋白在HIV初筛诊断中有重要应用.该研究合成了gp41全长基因序列,将其与pIVEX2.4c酶切连接构建表达载体,在大肠杆菌无细胞体系中实现了目标蛋白的全长可溶表达.考察了添加不同浓度非离子型去污剂Brij78对蛋白可溶性的影响,在0.2％ Brij78条件下,可溶性gp41重组蛋白的表达水平达到650μg/mL.Ni2亲和层析纯化目标蛋白,纯度达到95.6％;超滤浓缩后,蛋白浓度为0.9 mg/mL,总回收率为70.8％.免疫反应性检测结果显示该gp41重组抗原制备的乳胶HIV抗体诊断试纸能与不同滴度的HIV-1型阳性标本反应,在检测线位置出现红色条带,而与HIV-1型阴性标本无反应.该研究制备了具有完整氨基酸序列的HIV-1型gp41重组抗原,为进一步提高HIV抗体诊断试剂的质量打下了基础.
