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  • 短葶山麦冬皂苷C的细胞内分布研究

    作者:顾文叶;张靖;刘吉华

    制备纯化短葶山麦冬皂苷C(DT-13)单克隆抗体,选用人脐静脉内皮细胞(HUVEC)及人宫颈癌细胞(HeLa)为研究对象,通过MTT法筛选给药浓度,以细胞免疫荧光定位法探索DT-13在细胞内的作用分布和蓄积情况及其特点.结果显示,在对细胞无显著毒性作用的DT-13浓度下,DT-13能迅速透过细胞膜进入胞浆,逐渐进入细胞核并长时间蓄积.DT-13(5.0 μmol/L)在给药30 min前主要分布于人脐静脉内皮细胞(HUVEC)细胞的胞浆,给药12 h后主要蓄积于细胞核内且持续时间可达24 h.而对人宫颈癌细胞(HeLa),与HUVEC细胞相比,DT-13(2.5 μmol/L)能更快进入并蓄积于细胞核.提示DT-13可能通过作用于细胞核而发挥其主要的生物活性.该方法能直观、可靠、便捷地观察DT-13在细胞内的定位及动态变化,为中药皂苷类活性成分的药效及作用机理研究提供新的技术方法.

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