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木榄θ型谷胱甘肽转移酶(BgGSTT) cDNA的克隆及其在盐胁迫下的表达分析
谷胱甘肽转移酶(Glutathione S-transferases,GSTs,EC 2.5.1.18)是生物体内重要的一种解毒和抗氧化酶类.为进一步研究该酶在木榄适应盐生环境中的作用,从前期构建的木榄幼叶cDNA文库中克隆到编码theta型GST(BgGSTT)的cDNA全序列,分析和预测了其编码产物的结构特征,探讨了该基因在不同盐度下生长的木榄幼苗叶片及根中的表达变化.结果发现:编码BgGSTT的cDNA全长1111 bp,编码区为753 bp,编码的蛋白由250个氨基酸残基组成,理论相对分子质量为28.1k,pI为9.42.系统发育分析显示BgGSTT与来源于拟南芥和乳浆大戟的GSTT同源性较高(identity分别为72%和65%).利用荧光实时定量RT-PCR检测了BgCSTT在不同盐度下生长的木榄幼苗叶片及根中的表达变化,结果发现BgGSTT基因在木榄幼苗叶片中表达量较高,并且随着培养盐度的升高其表达逐渐加强,在25%盐度达到高,随后稍有下降但仍维持在较高水平.根据上述结果,推测BgGSTT基因可能参与了木榄适应盐胁迫的过程,并且该基因的表达在木榄幼苗叶片和根中具有严格的转录调控机制.
关键词: 木榄 谷胱甘肽转移酶θ亚型 结构与功能 盐胁迫 基因表达