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麦芽糖结合蛋白AD7c-NTP融合蛋白文献资料
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AD7c-NTP与麦芽糖结合蛋白的融合表达、纯化及其抗血清制备
人工合成了编码AD7c-NTP的基因,并将其中的6种密码子GGA AGG AGA ATA CTA CCC分别突变成大肠杆菌偏爱密码子GGT CGT CGT ATC CTG CCG,PCR扩增后克隆到表达载体pMAL-c2上,构建表达质粒pMAL-AD7c,重组质粒导入E.coli BL21(DE3)构建工程菌,IPTG诱导实现了MBP-AD7c-NTP融合蛋白在工程菌中的高效表达,细胞裂解液经Amylose-resin亲和层析、DEAE-Sepharose离子交换层析以及Su-perdex 200凝胶过滤层析,得到了电泳纯的融合蛋白.纯化的融合蛋白免疫家兔制备了兔抗MBP-AD7c-NTP融合蛋白的抗血清,利用该抗血清及点杂交技术,初步分析了10例AD疑似患者的尿样,结果表明5例疑似患者的尿样呈阳性,另5例呈阴性.
关键词： 麦芽糖结合蛋白AD7c-NTP融合蛋白 表达 纯化 抗血清
