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  • 重组人胸腺素原α在大肠杆菌中的表达优化

    作者:杨旭;郭葆玉;叶正良;道书艳;张冉

    在15 L的生物反应器内,对重组人胸腺素原α(huPTMAα)在大肠杆菌TG-1中经IPTG 诱导后的表达条件进行优化;应用NBS-MICROS 15 L.T.DR型生物反应器(15 L),用工程菌E.coli pGEX-IN/PTMA,研究了诱导时不同的pH、温度、搅拌速率和IPTG浓度,利用正交试验对发酵条件进行了优化。经1次预试验和9次正式试验结果表明,huPTMAα的表达受溶氧条件的影响较显著,其中搅拌速率和通气量为大的影响因子,当其为250r/min时,表达水平高。经SDS-PAGE和凝胶扫描发现表达蛋白占菌体蛋白的60%以上。该实验为工程菌的中试提供了佳的表达诱导条件,对其稳定性,高效表达具有重要的指导意义。

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