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白唇竹叶青蛇毒5'-核苷酸酶对血小板聚集的影响及其机制研究
目的 研究白唇竹叶青蛇毒5'-核苷酸酶对血小板聚集的影响,探讨其作用机制.方法 采用比浊法测定白唇竹叶青蛇毒5'-核甘酸酶对二磷酸腺苷(ADP)、花生四烯酸(AA)、血小板活化因子(PAF)诱导血小板聚集的影响.结果 白唇竹叶青蛇毒5'-核甘酸酶能抑制ADP、AA、PAF诱导的血小板聚集,且其抑制率与剂量增加成正比;抑制血小板聚集作用与ADP的水解和腺苷的积累有关.结论 白唇竹叶青蛇毒5'-核甘酸酶能抑制血小板聚集,抑制作用主要通过水解ADP和积累腺苷,可能与阻断僦的生成有关.
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白唇竹叶青蛇(Trimeresurus albolabris)毒降纤酶的分离纯化以及性质
目的 从白唇竹叶青蛇(T. albolabris)毒中分离纯化无出血作用的降纤活性组分,探讨其理化性质及部分生物功能.方法 用DEAE-SephadexA-25,SephadexG-100和CM-SephadexC-50三步色谱法进行分离纯化.SDS-PAGE和HPLC鉴定其纯度和相对分子质量,平板法测定其降纤活性.结果 从白唇竹叶青蛇毒中分离纯化获得单一的降纤组分,能迅速水解纤维蛋白原或纤维蛋白原Aα链,缓慢水解Bβ链,而对γ链无作用,SDS-PAGE鉴定其相对分子质量为56000.EDTA能抑制其纤维蛋白原水解活性,而PMSF、β-巯基乙醇对其活性无影响,提示该组分为单链α金属蛋白酶.结论 从白唇竹叶青蛇毒中分离纯化得到1种无出血作用且降纤活性强的新蛇毒降纤酶.
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抗白唇竹叶青蛇毒卵黄抗体(IgY)的制备及其稳定性研究
目的 制备抗白唇竹叶青蛇毒卵黄抗体,并对其稳定性进行研究.方法 采用白唇竹叶青蛇毒对健康莱杭母鸡进行初次免疫和两次加强免疫;通过水提法、盐析法和嗜硫色谱法相结合对抗白唇竹叶青蛇毒卵黄抗体进行纯化;采用间接ELISA法对其效价及稳定性进行评价.结果 免疫后鸡卵黄中可以产生较高水平的抗白唇竹叶青蛇毒抗体,并可维持至10周;经三步法纯化得到的抗体IgY在SDS-PAGE上呈单一条带.其在20℃~65℃及pH值为4~12范围内都保持稳定的活性;而且经胰蛋白酶处理60 min,其活性降低趋势不明显.结论 此法获取的抗白唇竹叶青蛇毒抗体具有制备简单、稳定性好的优点.