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重组人白细胞介素21表达条件的探讨
目的 探讨重组人白细胞介素21工程菌诱导表达的佳条件.方法 用摇瓶发酵的方法探索不同诱导条件(诱导温度、诱导时间、接种量、IPTG浓度等)对目的蛋白质表达的影响.结果 该工程菌表达目的蛋白质的佳温度是42℃;高密度接种更有利于目的蛋白质的表达.结论 建立了BL251/pET-30a(+)-IL21工程菌佳诱导表达条件,为重组人白细胞介素21的制备奠定了基础.
关键词: 基因工程菌 重组人白细胞介素21 发酵 表达 -
重组人IL-21对人外周血淋巴细胞的活化作用
目的 观察重组人白细胞介素21(IL-21)对健康人外周血淋巴细胞的活化作用,检测IL-21对外周血B细胞表面抗原提呈相关分子的表达及对淋巴细胞亚群的影响.方法 重组人IL-21与健康人外周血单个核细胞(PBMC)共培养48h,用流式细胞技术检测T、B淋巴细胞表面CD69的表达,并与未加IL-21组进行比较;同时用流式细胞术检测B细胞表面主要组织相容性复合体Ⅰ及Ⅱ类分子(MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ)、CD80及CD86的表达量.细胞培养96h后检测淋巴细胞亚群的变化.结果 重组人IL-21能显著提高T、B淋巴细胞表面CD69的表达量,与未加IL-21组相比差异有统计学意义(P<0.05),但却不能提高B细胞表面MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ、CD80及CD86的表达量.经IL-21刺激后人淋巴细胞亚群中自然杀伤细胞(NK)细胞及自然杀伤T细胞(NKT)细胞比例明显增加.结论 重组人IL-21可以活化人的T、B淋巴细胞,同时IL-21刺激后人淋巴细胞亚群中自然杀伤细胞(NK)细胞及NKT细胞比例明显增加.
关键词: 重组人白细胞介素21 淋巴细胞