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霍乱弧菌致病因子诱导人肠上皮细胞炎症反应的实验研究
目的: 鉴定诱导人肠上皮细胞炎性反应的霍乱弧菌分泌产物.方法: 野生型霍乱弧菌O1株C6706及其变异株培养上清刺激极化的人单层肠上皮T84细胞体外模型上层腔面,分析细胞受刺激后通透性和细胞活性以及白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因表达改变;分析上清中霍乱弧菌蛋白酶(Vibrio cholerae protease,PrtV)和霍乱弧菌溶细胞素(Vibrio cholera cytolysin,VCC)含量以及溶血能力.结果: PrtV缺失株培养上清可引起T84细胞层的炎性反应,表现为通透性增加和IL-8,TNF-α基因表达增加.肠上皮细胞炎性反应及红细胞溶血反应与VCC活性有关.结论: VCC是霍乱弧菌引起人肠上皮细胞炎性反应的主要因素,PrtV通过降解VCC而降低对肠上皮细胞的炎性反应.
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霍乱弧菌蛋白酶PrtV对霍乱弧菌溶细胞毒素引起人肠上皮细胞炎性反应的修饰
目的 研究霍乱弧菌分泌的蛋白酶PrtV(Vibrio cholerae protease,PrtV)对霍乱弧菌溶细胞毒素(Vibriocholera cytolysin,VCC)引起人肠上皮细胞炎性反应的修饰作用.方法 用VCC或PrtV处理后的VCC刺激人单层肠上皮T84细胞体外模型上层腔面,分析细胞受刺激后通透性和细胞活性改变以及细胞因子白细胞介素-8(interhkine-8,IL-8)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis facter-α,TNF-α)基因表达.结果 VCC可引起极性的肠道T84细胞的炎性反应,表现为通透性增加和IL-8以及TNF-α基因表达增加.纯VCC蛋白在浓度为160 ng/ml时引起肠上皮细胞炎性反应,而高浓度的VCC则导致肠上皮细胞损伤.VCC经PrtV处理后对肠上皮细胞炎性作用明显消失.结论 结果表明VCC在低浓度时引起肠道上皮的局部免疫防御反应,而高浓度的VCC则直接导致肠道上皮细胞损伤.此外,PrtV可以介导由VCC引起的肠上皮细胞炎性反应的修饰作用.
