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双表达盒文献资料
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大肠杆菌分泌表达重组水蛭素Ⅲ的新方法研究
目的:在已有的分泌表达载体pTASH基础之上构建一种更为高效的新型大肠杆菌分泌表达载体,并检验其分泌表达水平是否提高.方法:提取原始质粒pTASH作为模板,用PCR扩增重组水蛭素基因表达盒片段以后,再插入到原表达载体pTASH的BamHⅠ位点上,从而产生含有两个串联的水蛭素基因表达盒单元的质粒p(TASH)2,转入大肠杆菌进行摇瓶表达.结果:双表达盒菌种p(TASH)2进行摇瓶水平的培养,其上清液抗凝血酶活性可达3 500 ATU·ml-1.结论:与单表达盒质粒pTASH的表达水平(2 000 ATU·ml-1)相比,双表达盒质粒p(TASH)2的摇瓶表达水平显著提高.
