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阿霉素对人乳腺癌细胞MCF-7表达KIF4A的抑制作用
目的:探讨阿霉素对人乳腺癌细胞MCF-7表达KIF4A的影响.方法:用Western blotting方法检测阿霉素处理MCF-7细胞后不同时间该细胞表达的KIF4A蛋白;用不同浓度的阿霉素处理MCF-7细胞96 h后,检测KIF4A蛋白,并进行衰老相关半乳糖苷酶染色.结果:与未用阿霉素处理的MCF-7细胞相比,阿霉素处理的MCF-7细胞表达KIF4A蛋白降低;衰老相关半乳糖苷酶染色率由5%提高到42%,染色阳性的细胞形态亦呈衰老样变.结论:阿霉素处理MCF-7细胞可使KIF4A蛋白表达水平降低,KIF4A蛋白表达降低与阿霉素引起MCF-7细胞衰老的关系有待进一步研究.
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染色体驱动蛋白KIF4A对胃癌细胞迁移和转移的影响
目的 前期的研究证实,染色体驱动蛋白KIF4A在胃癌组织中低表达,过表达KIF4A抑制了胃癌细胞的增殖.本研究进一步研究KIF4A与胃癌细胞迁移与转移的关系,从而为胃癌临床治疗提供新的治疗靶点.方法 应用组织芯片和免疫荧光染色技术研究胃癌及其周围淋巴结组织中KIF4A蛋白分子的表达差异性;利用细胞小分子RNA干扰和Transwell迁移实验,检测KIF4A对细胞迁移运动能力的影响.结果 65％(26/40)的胃癌组织中KIF4A蛋白分子表达水平低于周围的淋巴结组织;KIF4A的表达水平与胃癌组织的TNM分期密切相关;KIF4A蛋白分子的表达随胃癌转移侵袭能力的增强而降低;抑制胃癌细胞内KIF4A蛋白分子的表达明显增强胃癌细胞的迁移运动能力.结论 染色体驱动蛋白分子KIF4A通过抑制胃癌细胞的迁移运动能力参与控制胃癌的临床转移过程.
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沉默驱动蛋白KIF4A的表达对卵巢癌细胞SKOV3迁移的影响
目的 研究沉默KIF4A基因对人卵巢癌SKOV3细胞迁移能力的影响.方法 检索针对KIF4A基因的小干扰RNA(siRNA),构建shRNA表达质粒,转染人卵巢癌细胞SKOV3,通过G418筛选建立稳定低表达KIF4A的SKOV3胞株.采用蛋白质免疫印记(Western blot)法检测shRNA对KIF4A蛋白分子的敲除效率.并通过细胞迁移实验评价低表达KIF4A对SKOV3细胞迁移能力的影响.结果 成功筛选出稳定低表达KIF4A的细胞株,选择干扰效率较高的细胞株进行实验.Transwell细胞迁移实验显示,低表达KIF4A的细胞株的迁移率较阴性对照组增长近3倍(P<0.05).结论 KIF4A低表达,可增强人卵巢癌细胞SKOV3的迁移能力.
关键词： 驱动蛋白 KIF4A蛋白 小片段发夹状干扰RNA 迁移
