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长链非编码RNA NANCI-NKX2.1信号通路在BPD新生小鼠肺组织中作用的研究
目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)NANCI-NKX2.1信号通路在新生小鼠支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)形成过程中的作用.方法:将32只C57BL/6J新生小鼠随机分为实验组、阴性对照组、生理盐水对照组和空白对照组,每组8只.实验组于生后第2天经鼻腔吸入含lncRNA NANCI干扰序列的腺病毒Ad-lnc NANCI shRNA的生理盐水1μL,阴性对照组将含无关序列发卡结构病毒质粒Ad-GFP NC的生理盐水1μL导入肺内,生理盐水对照组将生理盐水1 μL导入肺内,空白对照组除未予鼻腔吸入以外其他控制因素与上3组相同;于出生后7d处死各组小鼠并采集肺组织.采用HE染色法察看小鼠肺组织病理变化,采用RT-qPCR检测NANCI表达量,RT-qPCR及Western b1ot技术分别检测NKX2.1、SPC、AQP5 mRNA和蛋白表达水平.结果:实验组肺组织病理示新隔形成减少,肺泡腔扩大、部分融合,肺泡数目较少,RAC值下降(P＜0.05);肺组织NANCI表达量下降(P＜ 0.05);NKX2.1、SPC及AQP5mRNA和蛋白的表达量亦下降(P＜0.05).结论:NANCI-NKX2.1信号通路在BPD新生小鼠中可能起重要作用.
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高氧诱导肺损伤新生小鼠肺组织中长链非编码RNA NANCI的表达及对NKX2.1的调控作用
目的：探讨长链非编码RNA NANCI在高氧诱导肺损伤新生小鼠肺组织中的表达变化及对NKX2.1的调控作用。方法采用随机分组法将48只C57BL/6J新生小鼠随机分为空气组和高氧组，每组24只，各组再随机分为生后7 d组、14 d组、21 d组，每组8只。空气组置于室内环境（FiO2=21%）中饲养，高氧组置于高氧箱（保持氧浓度>95%）中饲养，在各时间点分别处死两组动物后收集肺组织标本。采用苏木精-伊红染色法观察小鼠肺组织病理变化；采用RT-qPCR及Western blot技术分别检测NANCI、NKX2.1的mRNA和蛋白表达水平。结果空气组新生小鼠肺组织NANCI和NKX2.1的mRNA表达水平7 d高（P<0.05），14 d与21 d呈同水平表达。与空气组比较，高氧组肺组织肺泡化程度降低，辐射状肺泡计数（RAC）减少（P<0.05），且高氧组RAC值随高氧处理时间延长逐渐降低（P<0.05）。各时间点高氧组NANCI mRNA、NKX2.1 mRNA及其蛋白表达水平均低于空气组（P<0.05），且随高氧处理时间延长逐渐降低（P<0.05）。NKX2.1与NANCI表达呈正相关（r=0.585，P=0.003）；两者与高氧组RAC水平均呈正相关（分别r=0.655、0.541，P<0.05）。结论 NANCI可能主要参与未成熟肺组织发育；肺组织损伤程度随高氧暴露时间的延长逐渐加重，且NANCI及NKX2.1水平与肺损伤程度相关，提示NANCI/NKX2.1靶基因信号通路可能参与新生小鼠高氧肺损伤过程。
