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当归补血微囊促血管新生中 JAK2/STAT3通路的作用研究
目的:探讨 JAK2/STAT3信号传导通路在当归补血微囊促血管新生中的作用。方法建立人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)模型,分别采用 CCK-8和流式细胞术检测 HUVEC 细胞活力和细胞凋亡情况;采用 Western blot 检测各组中 p-STAT3、VEGF 的表达情况;采用荧光定量 PCR,检测各组中 VEGF 基因和 miRNA-21的表达情况。结果20μg/mL 当归补血微囊作用于 HUVEC 24 h,可有效促进 HUVEC 的增殖,并上调 p-STAT3、VEGF 及 miRNA-21的表达;AG490能有效抑制当归补血微囊对 HUVEC 的促增殖作用,并减少 p-STAT3、VEGF 及 miRNA-21的表达。结论当归补血微囊促进血管生成的作用确实与 JAK2/STAT3信号途径有关。
关键词: 当归补血微囊 血管新生 JAK2/STAT3 通路 VEGF miRNA-21 -
常染色体显性多囊肾病中泛素连接酶β-TrCP 的表达及其作用和调控机制
目的:观察常染色体显性多囊肾病(ADPKD)患者及动物模型中泛素连接酶β-TrCP 的表达,初步探讨人囊肿衬里上皮 OX161细胞中β-TrCP 的作用和调控机制。方法在 OX161细胞内转染β-TrCP 的 siRNA,采用蛋白免疫印迹法检测增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,MTT 比色法检测吸光度;在 OX161细胞中抑制 JAK2/STAT3通路或转染 STAT3质粒,采用蛋白免疫印迹法检测 JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3和β-TrCP 的表达。收集ADPKD 行肾脏切除术患者的肾脏组织和肾旁距癌组织5 cm 以上的正常肾脏组织(正常对照组)、雄性 Han:SPRD (cy/+)大鼠(ADPKD 模型)和野生型 Han:SPRD(+/+)大鼠肾组织(对照),均采用蛋白免疫印迹法检测β-TrCP的表达。收集 Pkd1flox/flox;tamoxifen-Cre+小鼠(ADPKD 模型)和 Pkd1flox/flox;tamoxifen-Cre-小鼠(对照)肾组织,采用免疫组织化学法检测β-TrCP 的表达 和 亚 定 位。结果与 UCL93细胞相比,OX161细 胞 中 JAK2/STAT3通路明显活化,β-TrCP 表达量增加;β-TrCP 敲减后细胞增殖减慢(P <0.05);WP1006抑制 JAK2/STAT 3通路后,β-TrCP 表达量减低,转染 STAT 3质粒后,β-TrCP 的表达量增加。与正常对照组、野生型 Han:SPRD(+/+)大鼠及 Pkd1flox/flox;tamoxifen-Cre-小鼠比较,ADPKD 患者肾组织、Han:SPRD(Cy/+)大鼠肾组织及 Pkd1flox/flox;tamoxifen-Cre+小鼠肾组织中β-TrCP 表达量明显增加。结论在人囊肿衬里上皮 OX161细胞株中β-TrCP表达量增多,且受 JAK2/STAT3通 路 调 控;在 ADPKD 患者及其模型鼠肾脏组织中β-TrCP 表达量也增加。β-TrCP可能参与促进囊肿的发生和发展。
关键词: 常染色体显性多囊肾病 肾组织 泛素连接酶β-TrCP 细胞增殖 JAK2/STAT3 通路 动物 实验 鼠