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β3GnT8/β3GalT7文献资料
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人类β3-N-乙酰氨基葡萄糖基(β3半乳糖)转移酶β3GnT8/ GalT7的抗体制备、免疫组化分析及其亚细胞定位
目的 探讨β3GnT8(β3GalT7,AY277592,EC2.4.1.-)基因(人类β3-糖基转移酶家族中的一个新成员)的功能.方法 原核表达该蛋白,以纯化的蛋白免疫新西兰大白兔,制备多克降抗血清;以Western blot和免疫组化分析其在多种组织细胞的表达情况;并通过荧光免疫细胞化学进行亚细胞定位.结果 获得了较纯的表达蛋白和高效价、高特异性的抗血清,片且发现该蛋白大部分位于核膜周围的胞浆中;免疫组化分析显示肿瘤细胞和组织中该酶有较高的表达,与正常组织比较具有一定的差异性.结论 该实验获得了β3GnT8/β3GalT7基因的蛋白质和相应抗体,并且对该蛋白进行了亚细胞定位,为对其生物学功能的进一步研究奠定了基础.
关键词： β3GnT8/β3GalT7 抗血清 免疫组化 亚细胞定位 -
人类β3GnT8/β3GalT7对人4IgB7-H3蛋白的翻译后糖基化修饰作用
目的 探讨人类β1,3N-乙酰氨基葡萄糖基转移酶8/133半乳糖基转移酶7(β3GnT8/β3GalT7)与人4IgB7-H3蛋白的相互作用,以期阐明该糖基转移酶对人4IgB7-H3蛋白的翻译后糖基化修饰作用.方法 在线预测软件预测人4IgB7-H3蛋白氨基酸序列上潜在的糖基转移酶作用位点;免疫共沉淀探讨β3GnT8/β3GalT7与人4IgB7-H3蛋白的相互结合作用;细胞免疫荧光化学技术研究两种蛋白质在细胞内的空间定位.结果 人4IgB7-H3蛋白氨基酸序列上潜在的N一糖基化位点共有8个,O-β-GIcNAc的附着位置共有18个;β3GnT8/β3GalT7与人4IgB7-H3蛋白能相互结合而被共沉淀;两种蛋白质能在人肺癌A549细胞中共定位.结论 人类β3GnT8/β3GalT7可能对人4IgB7-H3蛋白有糖基化修饰作用.
关键词： β3GnT8/β3GalT7 B7-H3 免疫共沉淀 亚细胞定位
